菊花的组织培养导学案

详细内容

一、学习目标
1.说明植物组织培养的基本原理。
2.学习植物组织培养的基本技术。
3.进行菊花或其他植物的组织培养。
二、学习重点与难点
重点：1.植物组织培养的相关概念和过程
2.影响植物组织培养的因素
3.植物组织培养过程中使用的无菌技术。
难点：1.影响植物组织培养的因素。
2.植物组织培养过程中使用的无菌技术。
三、学法指导：小组交流合作 一对一检查通关
四、自主学习
一、植物组织培养的相关概念和基本过程
1.植物组织培养 的相关概念
（1）细胞分化 ：植物的个体发育过程中，细胞在__________、__________和__________上都会出现稳定性的差异，形成这些差异的过程就叫做细胞分化。细胞分化是基因__________的结果。
（2）细胞的全能性： __________的植物细胞仍然具有发育成为__________的潜能。细胞全能性是组织培养的基本原理。
（3）愈伤组织：由离体的植物器官、组织或细胞在一定的培养条件下经过__________过程形成的组织，就叫愈伤组织，愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种__________的呈无定形状态的__________。
（4）脱分化：由__________的植物组织或细胞产生__________的过程，称为脱分化，又叫去分化。
（5）再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成__________，这个过程叫做再分化。
（6）外植体：用于离体培养的植物器官或组织片段。
2.植物组织培养的基本过程

移植
――→试管苗―――→完整的植物体
二、影响植物组织培养的因素
1.内部因素：不同的植物组织，培养的难易程度差别很大。同种植物材料，__________ ，__________ 等也会影响实验结果。菊花的组织培养，一般选择 __________的茎上部新萌生的侧枝。
2.外部因素：
（1）营养条件
常用的是__________ 培养基，其主要成分包括：__________，如_______________________ ___；__________ ，如______________________________ ；__________ 等。
（2）植物激素
植物激素中__________ 和__________ 是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。____________________、____________________ 以及__________等，都会影响实验结果。
（3）环境因素
__________ 、__________ 、 __________等条件也能影响植物组织培养。菊花组织培养，一般PH控制在 __________ ；温度控制在 __________ ；每天用日光灯 照射__________小时。
【思考】(1)生长素使用的先后顺序、用量比例不同分别会造成哪些影响？

三、实验操作过程
1.制备MS固体培养基
实验室一般使用4℃保存的配制好的培养基母液来制备
（1）配制各种母液。
配制母液时，大量元素浓缩_____ ____ _ ，微量元素浓缩__________ 。常温保存。激素类、维 生素类以及用量比较小的有机物可以按照1mg/ml的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。
（2）配制培养基。
配制1LMS培养基时，将称量好的琼脂加入800mL蒸馏水，加热熔化，然后加入蔗糖30g,依次加入母液，定容至1000mL。__________，然后分装到锥形瓶中，每瓶分装__________。
（3）灭菌。高压蒸汽灭菌
2、外植体消毒
选取菊花茎段时，要取 ____________________。
无菌技术包括培养基消毒灭菌和植物材料（外植体）的消毒灭菌。对培养材料进行表面灭菌时，一方面要考虑_______________；另一方面还要考虑植物材料的__________。不同药剂、不同植物材料，甚至不同器官要区别对待。一般情况下，细菌污染可能是由接种人员造成的，真菌污染可能是___ ______灭菌不当。
过程：流水冲洗→软刷刷洗→流水冲洗① 过程
流水冲洗→软刷刷洗→流水冲洗__________→无菌吸水纸吸干外植体表面→体积分数为__________的酒精中摇动2～3次，持续__________→无菌水清洗→无菌吸水纸吸干外植体表面→质量分数为0.1?的__________溶液中1～2min→无菌水中至少清洗3次
3、接种
接种前，用 体积分数 70%的酒精将工作台擦拭，然后点燃酒精灯。所有的接种操作必须在酒精灯旁进行，并且每次使用器械后，都要用火焰灼烧灭菌