乳块消合剂的质量标准研究(一)
详细内容
【关键词】 乳块消合剂；,,质量标准；,,高效液相色谱法；,,丹参素
摘要：目的建立乳块消合剂的质量标准。方法采用薄层色谱法鉴别乳块消合剂中橘叶、丹参、皂角刺、地龙；用高效液相色谱法对制剂中丹参素进行定量分析。结果定性鉴别分离度好，专属性强；丹参素的含量测定线性范围为0.106 7～1.067μg（r＝0.999 8，n=6）,平均加样回收率为99.87%（RSD=1.73%，n=6）。结论所建立之方法可靠、准确、专属性强，可有效控制乳块消合剂的质量。
关键词：乳块消合剂； 质量标准； 高效液相色谱法； 丹参素
Abstract：ObjectiveTo establish the quality standard for Rukuaixiao Mixture . MethodsPheretina,Radix et Rhizoma Salviae Miltiorrhizae, Gleditsia sinensis stings and Folium Citri were identified by TLC.Danshensu was determined by HPLC. ResultsThe characteristic identification by TLC was distinct and highly specific.The quantitative eva luation of thymol had the linear range of 0.1067～1.067μg （r＝0.9998, n=6）.The average recovery of standard addition was 99.87%，and RSD was1.73%.ConclusionThe method is reliable,aurate and specific.It can be used for quality control of Rukuaixiao Mixture.
Key words：Rukuaixiao mixture; Quality standard; HPLC; Danshensu
乳块消片收载于2005年版《中国药典》（Ⅰ部）中，由橘叶、丹参、皂角刺、王不留行、川楝子、地龙等6味中药组成，具有疏肝理气，活血化淤，消散乳块之功效。临床主要用于肝气郁结，气滞血淤，乳腺增生，乳房胀痛等症〔1〕。乳块消合剂系乳块消片改剂而成。为建立质控标准，我们对方中的橘叶、丹参、皂角刺、地龙进行薄层鉴别，并采用高效液相色谱法对丹参中的水溶性成分丹参素进行了含量测定，以期为该制剂的质控工作提供坚实的研究基础。
1 仪器与试药
日本岛津高效液相色谱仪（岛津LC10A输液泵，SPD10A紫外检测器，N2000色谱工作站）。硅胶G（青岛海洋化工厂）、聚酰胺薄膜（青岛海洋化工厂），橙皮苷（批号0721200211，供鉴别用）、丹参对照药材（批号09239403）、原儿茶醛（08109803，供鉴别用）、皂角刺对照药材（批号121210010）、地龙对照药材（批号0987200204）均由中国药品生物制品检定所提供；乳块消合剂（批号20040301，20040302，20040303）。
2 方法与结果
2.1 鉴别研究
2.1.1 橘叶的薄层色谱鉴别取样品3批，各取4 ml,蒸干，残渣加水30 ml使溶解，用乙醚振摇提取3次，30 ml/次。弃去乙醚提取液，水层挥去乙醚，加在聚酰胺柱（30～60目，2g,内径1 cm，湿法装柱）上，用水100 ml洗脱，再用70%乙醇50 ml洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸干，残渣加水15 ml使溶解，用醋酸乙酯振摇提取2次，15 ml/次。合并醋酸乙酯提取液，蒸干，残渣加乙醇1 ml使溶解，即得供试品溶液。另取橙皮苷对照品加乙醇溶解制成2 mg/ml的溶液，作为对照品溶液。同法制成缺橘叶的阴性对照溶液。按照薄层色谱法〔2〕实验，吸取上述3种溶液各6 μl分别点于同一聚酰胺薄膜上，以醋酸乙酯甲醇水(10∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365 nm下检视。供试品色谱中，分别在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。结果见图1。
2.1.2 丹参的薄层色谱鉴别取样品3批，各取8 ml,加水20 ml稀释，用石油醚（60～90℃）振摇提取3次，20 ml/次。弃去石油醚液，水溶液用醋酸乙酯振摇提取3次，20 ml/次。合并醋酸乙酯提取液，蒸干，残渣加乙醇1 ml使溶解，即得供试品溶液。取丹参对照药材3 g,加水60 ml,煎煮1 h，滤过，滤液浓缩至约10 ml,加乙醇使含醇量达70%，滤过，滤液蒸干，残渣加水20 ml使溶解，用醋酸乙酯振摇提取3次，20 ml/次。合并醋酸乙酯提取液，蒸干，残渣加乙醇1 ml使溶解，即得对照药材溶液。同法制成缺丹参的阴性对照溶液。按照薄层色谱法〔2〕实验，吸取上述4种溶液各6 μl分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿丙酮甲酸(5∶2∶0.8)为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏15 min，取出，喷以3%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。结果见图2。
图1 橘叶TLC图谱 （略）
图2 丹参TLC图谱（略）
2.1.3 皂角刺的薄层色谱鉴别取样品3批，各取7 ml,加石油醚（60～90℃）10 ml萃取，弃去石油醚层，取水层蒸干，加95%乙醇使溶解，定容至2 ml,即得供试品溶液。另取皂角刺对照药材2 g，加70%乙醇30 ml回流2 h，滤过，滤液挥至无醇味，加石油醚（60～90℃）10 ml萃取，弃去石油醚层，取水层蒸干，加95%乙醇使溶解，定容至2 ml,即得对照药材溶液。同法制成缺皂角刺的阴性对照溶液。按照薄层色谱法〔1〕实验，吸取上述3种溶液各4 μl分别点于同一硅胶G薄层板上，以二甲苯醋酸乙酯甲酸(7∶2∶1)为展开剂〔4〕，展开，取出，晾干，置紫外光灯365 nm下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上显相同的荧光斑点，阴性对照液无干扰。结果见图3。