分光光度法测定毛老虎茎中三萜酸的总含量(一)

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作者：黄秀香， 袁霞，林翠梧， 陈丽芬

【关键词】 毛老虎；,,分光光度法；,,香草醛

　　摘要：目的建立香草醛-冰醋酸体系分光光度法测定毛老虎中总三萜酸的方法。方法利用在高氯酸的条件下香草醛-冰醋酸与三萜酸的反应测定总三萜酸。结果总三萜酸在2.53～13.14 μg/ml呈良好的线性关系，测定样品回收率为99.07%。结论 该法简便、快速、灵敏。

　　关键词：毛老虎； 分光光度法； 香草醛

　　Determination of Total Content of Triterpenoids in Stems of Hyptis suaveolens (L.) Piot by Spectrophotometry

　　Abstract：ObjectiveTo develop the determination method of total triterpenoids in vanillinglacial acetic acid system by spectrophotometry.MethodsVanillin was used as colour developing reagent in the presence of perchloric acid.ResultsThe calibration curve of total triterpenoids had good linear relationship in the range of 2.53～13.14 μg/ml. The average recovery was 99.07%.ConclusionThe method is simple ,easy and reproducible .

　　Key words：Hyptis suaveolens (L.)Piot; Spectrophotometry; Vanillin

　　毛老虎Hyptis suaveolens (L.)Piot为唇形科山香属植物，别名山薄荷、假藿香，本属植物共约400种，绝大多数均有药用价值。《全国中草药汇编》载：“辛、苦、平。疏风利湿，行气散淤。主治感冒头痛，胃肠炎，痢疾，腹胀；外用治跌打肿痛，创伤出血，虫蛇咬伤，湿疹，皮炎〔1〕。”从毛老虎中提取三萜酸国内还未见报道，印度的Mistra ,Truna N等〔2〕曾报道从毛老虎中提取得到三萜酸，我们做预实验时，用熊果酸标准品作TLC对照实验，以1%香草醛浓硫酸溶液显色，两者显示出Rf值相同的樱红色斑点。为了进一步研究三萜酸，本实验以熊果酸为对照品采用香草醛-冰醋酸比色，在高氯酸条件下对毛老虎茎中总三萜酸进行测定，从而有效优化总三萜酸的提取工艺。

　　1 器材

　　UV2501紫外分光光度计（日本岛津）：KSB1200型数控超声波细胞粉碎机（昆山市超声仪器有限公司）；试剂：高氯酸、冰醋酸、香草醛、无水乙醇均为分析纯，熊果酸购于中国药品生物制品鉴定所；毛老虎采集于广西南宁市效区。

　　2 方法

　　2.1 对照品溶液的配制精密称取熊果酸对照品8.1 mg，置100 ml容量瓶中，用无水乙醇超声溶解，并定容至100 ml，即得。

　　2.2 测定方法取适量标准（或样品）溶液，水浴挥干，加5%香草醛-冰醋酸液0.4 ml，加高氯酸0.8 ml,置60℃水浴加热15 min，冰浴冷却后，加冰醋酸5.0 ml，摇匀，待测。

　　2.3 影响本法的各种因素选择5%香草醛-冰醋酸溶液用量、高氯酸用量、水浴加热温度、水浴加热时间等4个因素，每个因素选择3个水平，编制因素水平表，见表1〔3〕。

　　表1 实验因素水平（略）

　　3 结果

　　3.1 测定波长选择分别取样品及标准溶液适量，按“测定方法”项下处理后，在400～650 nm范围内扫描，对照品溶液和样品溶液均在550 nm处有最大吸收，确定550 nm为测定波长。

　　表2 正交实验结果（略）

　　由表2中极差R值大小显示，各因素作用主次为A＞C＞D＞B，因此以A2B2C3D2为佳，即最佳反应条件为：5%香草醛-冰醋酸液加入量为了0 .4 ml，高氯酸加入量为0.8 ml，水浴加热温度为60℃，水浴加热时间为10 min。