新疆狭叶红景天黄酮的超声提取及含量测定(一)
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【关键词】 超声技术;,,红景天;,,黄酮;,,提取;,,含量测定
摘要:目的:从新疆狭叶红景天中提取黄酮,并测定其含量。方法:运用超声技术提取红景天总黄酮,用比色法测定黄酮含量。结果:测得红景天中黄酮含量21.15%,平均回收率为98.2%,RSD=1.33%(n=5)。结论:首次运用超声技术从新疆红景天中提取出黄酮与常规法比较,反应速度加快,实验结果令人满意。
关键词:超声技术; 红景天; 黄酮; 提取; 含量测定
Ultrasonic Extraction and Determination of Chromoco in Rhodila kirilowii Rgl.ex Maxim.
Abstract:Objective:To extract and determine chromoco of Rhodiola kirilowii Rgl.ex Maxim.Methods:Ultrasonic technology applied to chromoco of Rhodiola kirilowii Rgl.ex Maxim.were obtained,content determination with colorimetry.Results:The chromoco content of Rhodiola kirilowii Rgl.ex Maxim.is 21.15%,recovery rate is 98.2%.Conclusion:Ultrasonic technology applied to the chromoco of Rhodiola kirilowi iRgl.ex Maxim. has been obtained for the first time.
Key words:Ultrasonic Technology; Rhodiola kiriJowii Rgl.ex Maxim.; Chromoco; Extraction; Content determination
新疆狭叶红景天Rhodiolakirilowii Rgl.exMaxim.为多年生草本,主要分布于天山海拔1 600~5 600 m 的区域,新疆有多种红景天,其中狭叶红景天为主要品种,维吾尔译音为:克孜马热力〔1〕。近年来的药理研究表明,狭叶红景天黄酮具有抗血栓素形成、抗病毒、抗肿瘤、降血糖等作用〔2〕。为提高药材利用率,节约药材资源,我们运用超声技术从狭叶红景天中提取黄酮,并测定其含量〔3〕,反应速度加快,实验结果令人满意。
1 仪器、试剂及样品
1.1 仪器岛津UV2401PC紫外可见分光光度计,DL360超声波仪(35kHz,浙江象山县石浦海天电子仪器厂),TG328B分析天平,DZKWC电子恒温水浴(北京光明医疗仪器厂),R201旋转蒸发器(上海申胜生物技术有限公司),索氏提取器。
1.2 材料与试剂对照品芦丁购自中国药品生物制品检定所。其余试剂均为分析纯新疆狭叶红景天:采自天山北坡新疆乌鲁木齐南山海拔2 500~3 500 m的深山里,经石河子大学生物学院何敬琨教授鉴定为Rhodiola kirilowii Rgl.exMaxim.。春季挖取,去杂质,切片晒干,破碎后备用。
2 方法与结果
2.1 黄酮测定
2.1.1 标准曲线制备以芦丁为对照品测定狭叶红景天中总黄酮含量,加入铝离子试剂,同时控制适宜pH值,使黄酮化合物与铝盐形成络合物在可见区能获得稳定的特征吸收峰。精密称取120℃干燥恒重的芦丁标准品10 mg,加85%乙醇溶解,定容至50 ml容量瓶中,摇匀,制成浓度为0.2 mg/ml的标准品溶液。分别取标准品溶液0,0.2,0.5,1.0,2.0,3.0,4.0 ml于10 ml容量瓶中,加5%亚硝酸钠0.4 ml,放置6 min后,加10%硝酸铝0.4 ml,放置6 min,再加4%的氢氧化钠4 ml,加水至刻度,摇匀,放置15 min,进行全波长扫描,在510 nm处均有最大吸收。以测定结果计算得直线方程C=79.22A-0.466,r=0.997 8。在40~800 μm/ml的范围内,浓度与吸收度有良好的线性关系。
2.1.2 供试品溶液制备狭叫红景天经粉碎后过65目筛,细粉于烘箱中60℃干燥4 h待用。精密称取样粉1 g于烧瓶中,加入85%乙醇60 ml,将此烧瓶放入DL360超声波仪中,分别超声提取1,2,3次,每次20,30,40 min。将提取液转移到100 ml容量瓶中,用85%乙醇定容,作为供试品溶液。
2.1.3 样品含量测定精密吸取供试品溶液2.0 ml,置10 ml容量瓶中,按与标准曲线相同的方法显色测定。在510 nm处测吸收度以提取2次,30 min/次,吸收度最大。通过标准曲线,计算出样品黄酮含量。分别为20.78%,20.96%,21.14%,21.33%,21.56%平均含量为21.15%.