脑力智宝对不完全脑缺血损伤大鼠的保护作用(一)

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【摘要】 目的研究脑力智宝对不完全脑缺血损伤大鼠的保护作用。方法采用结扎双侧颈总动脉制作不完全脑缺血损伤大鼠模型，连续给药30 d后，进行血液流变学、脑组织丙二醛（MDA）与一氧化氮（NO）的含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力的检测，并观察海马神经元、神经胶质细胞与微血管内皮细胞超微结构的变化。结果与假手术组比较，不完全脑缺血损伤大鼠全血低切黏度、全血高切黏度、血浆黏度、红细胞刚性指数、红细胞聚集指数明显升高，脑内MDA、NO含量明显升高，SOD活力明显下降，海马神经元、神经胶质细胞与血管超微结构发生明显改变。脑力智宝能显著降低全血高切黏度、血浆黏度、红细胞刚性指数、脑组织内MDA、NO含量，提高SOD活力，并明显改善海马神经元、神经胶质细胞与血管超微结构的损伤。结论脑力智宝对脑缺血损伤具有保护作用，其作用机制可能与其促进血液循环，改善血液流变性，减轻自由基损伤，从而改善脑组织的超微结构有关。

【关键词】 脑力智宝 脑缺血 超微结构 血液流变学 自由基

脑力智宝主要由当归、红花、远志、石菖蒲、黄精、益智仁、龟甲、枸杞子等组成，用于治疗精神发育迟滞、脑瘫、癫痫、脑血管病后遗症、脑外伤后遗症、脑炎后遗症、老年性痴呆等脑病伴发的智力和肢体功能障碍，具有一定的疗效。临床研究表明脑力智宝能明显改善脑梗塞后遗症患者运动、语言及精神方面的症状〔1〕。本实验观察了脑力智宝对不完全脑缺血损伤大鼠的保护作用，旨在阐明脑力智宝用于治疗脑缺血损伤性疾病后遗症的机理。

　　1 材料与仪器

　　1.1 动物与分组 Wistar大鼠，体重220～250 g，雌雄各半，广州中医药大学实验动物中心提供。

　　1.2 药物 脑力智宝由广东高明脑病医疗医药研究院提供，制备成1 g生药/ml供试液，灌胃前按所需浓度稀释。尼莫地平（nimodipine, Nim）片剂，德国拜耳公司产品，批号CAGFT3。

　　1.3 试剂与仪器 丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）与总蛋白试剂盒，南京建成生物工程研究所产品。722光栅分光光度计，上海第三分析仪器厂产品；LBY-NM微量血浆粘度计，LBY-N6A型旋转式血液粘度计，北京普利生精密仪器研究中心产品；JEM-1200EX透射电子显微镜，日本JEOL公司产品。

　　2 方法

　　2.1 不完全脑缺血损伤模型的制备〔2〕大鼠经10%乌拉坦1 g/kg腹腔注射麻醉后，仰卧位固定，行颈正中切口，分离双侧颈总动脉，用丝线结扎，缝合皮肤。假手术组大鼠同法分离双侧颈总动脉，但不结扎。

　　2.2 分组与给药 将造模成功动物随机分为3组：模型组、尼莫地平组、脑力智宝组，每组8只，雌雄各半。假手术组大鼠8只，雌雄各半。待大鼠苏醒后，尼莫地平组按12 mg/kg灌胃给予尼莫地平混悬液，脑力智宝组按8 g/kg灌胃给予脑力智宝供试液，假手术组和模型组分别给予等容量生理盐水，1次/d，连续30 d。

　　2.3 血液流变学及生化指标测定 连续给药30 d后，每组各取6只，眼内眦静脉取血3 ml，进行血液流变学测定。麻醉下处死，快速断头取脑，脑组织用预冷的生理盐水制成1∶10（W/V）的匀浆，3 000 r/min离心10 min，取上清液，依照试剂盒说明书检测SOD活力及MDA、NO及组织蛋白含量。

　　2.4 电镜观察 每组剩余的两只大鼠，腹腔注射乌拉坦麻醉后，剪开胸腔，暴露心脏，先以100 ml生理盐水经主动脉冲洗，然后灌注由2%多聚甲醛和2.5%戊二醛组成的4℃ 0.1 mol/L的磷酸盐缓冲液(pH7.4)300 ml，取脑背侧海马CA1区组织1.0 mm×1.0 mm×1.0 mm。常规电镜样品制备程序漂洗、脱水、浸透及环氧树脂包埋，超薄切片后，将切片捞至载网上，干燥后行铅铀双染，透射电镜观察超微结构的改变。每个标本观察神经元、胶质细胞与血管的病理变化，并进行拍摄。

　　2.5 统计学方法 实验数据用±s表示，运用统计软件SPSS for windows 11.5 进行单因素方差分析。