虎杖中白藜芦醇的提取与分离工艺研究(一)
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作者：许汉林， 付宜和， 高鹏， 许承军
【关键词】 虎杖；,,,白藜芦醇；,,,大孔树脂；,,,硅胶柱层析
摘要：目的优选虎杖的白藜芦醇最佳提取工艺。方法①采用正交实验法，以白藜芦醇提取量为指标，高效液相色谱法（HPLC）测含量，优选提取工艺条件。②以大孔树脂富集及色谱法分离、纯化白藜芦醇。结果乙醇提取最佳工艺为10倍量的90%乙醇回流提取2次，1 h/次。经AB8树脂吸附富集，硅胶柱色谱纯化，可获得高纯度的白藜芦醇产品。结论该工艺可用于指导生产。
关键词：虎杖； 白藜芦醇； 大孔树脂； 硅胶柱层析
Study on Extraction Process of Resveratrol in Polygonum cuspidatum
Abstract:ObjectiveTo study the optimum extraction process of resveratrol in Polygonum cuspidatum.Methods①The optimum extraction process was investigated by orthogonal design and the index of the method was the contents of resveratrol.②The technology of macroporous adsorptive resin and chromatography was used in the separation and purification of resveratrol by HPLC.ResultsThe optimum condition of ethanol extraction:10 times amount of 90% ethanol and extracted 2 times,1 hour one time.The purity of the product was gained by the technology of resin AB8 adsorption and silica column chromatography purification.ConclusionThe optimum extraction process can direct production.
Key words:Polygonum cuspidatum; Resveratrol; Macroporous adsorptive resin; Slica column chromatography
白藜芦醇（3，4＇，5，三羟基二苯乙烯；transresveratrol）是一类亲脂性多酚物质，在虎杖、葡萄、花生、松树等植物中存在，其中以虎杖的含量为最丰富。其游离的白藜芦醇高于0.58%〔1〕。虎杖为蓼科植物虎杖Polyponum cuopicltum Sied.et Zu的根茎。具有祛风利湿、散淤定痛、止咳化痰功效〔2〕。白藜芦醇具有抗血小板凝聚，保护肝脏，抗肿瘤活性等药理作用，特别是对心脑血管系统具有较强的药理活性。本实验采用正交实验，利用乙醇回流提取的方法和大孔树脂吸附及硅胶柱色谱技术，并采用HPLC方法进行含量测定〔3，4〕，对虎杖中的白藜芦醇进行提取分离纯化研究。本研究旨在为虎杖开发利用提供科学依据。
1 材料与仪器
DIONEX HPLC色谱仪P680 HPLC Pump.UVC 170检测器Chromeleon工作站万分之一电子天平BS110S（Sartorius公司）白藜芦醇对照品（Sigma公司）虎杖饮片（湖北省药材公司）经鉴定为蓼科植物Polyponum cuopicltum Sieb.et Zu干燥根茎。
2 方法与结果
2.1 白藜芦醇含量测定方法
2.1.1 色谱条件色谱柱ODSC18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相乙腈∶水（0.02%磷酸）30∶70；流速1 ml/min；柱温30℃；检测波长303 nm；20 μl进样环。理论塔板数不低于3 000；分离度大于1.5。
2.1.2 线性关系考察精密称取干燥白藜芦醇对照品330 μg，置10 ml容量瓶中加甲醇制成浓度33 μg/ml的溶液作为对照品溶液。分别吸取对照品溶液各1，3，5，7，9 μl，按上述色谱条件进行测定，以峰面积积分值为纵坐标，白藜芦醇对照品进样量换算为浓度值为横坐标，计算线性回归方程为：Y=1.988 8X-0.116 6 （n=0.999 2），其进样浓度值在1.65 ~14.85 μg/ml范围内线性关系良好。
2.2 提取工艺优选根据初步筛选的结果，按表1设定的因素水平进行正交实验，筛选最佳的工艺条件。