高效液相色谱法测定血滞通胶囊中腺苷的含量(一)
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作者：苏彦斌，张凤荣，苏彦文
【摘要】 目的应用高效液相色谱(HPLC)法测定血滞通胶囊中腺苷的含量。方法采用 Agilent C18柱（4.6 mm×250 mm, 5μm PN 990967-902，SNUSNH008613，LNBO5096，made in USA），以0.02%的冰醋酸溶液（用三乙胺调节pH值至6.5）-甲醇（92∶8）为流动相，检测波长为260nm，柱温28℃。结果腺苷的进样量在0.010 5～0.314 4μg范围内呈良好的线性关系，r=0.999 99（n=7）。腺苷的平均回收率为100.1%，RSD 为1.81%（n=6）。结论 方法准确、简单、重复性好。
【关键词】 血滞通胶囊； 薤白； 腺苷； 高效液相色谱法
Abstract：ObjectiveTo establish a determination method of the content of adenosine in Xuezhitong Capsule by HPLC. MethodsAgilent C18 column (4.6 mm×250 mm, 5μm PN 990967-902, SNUSNH008613, LNBO5096, made in USA) was used. For the determination of the content of adenosine, the mobile phase was pH 6.5 liquid of both 0.02% acetic acid glacial with triethylamine and methanol (92∶8), and the detection wavelength was 260nm, column temperature was 28℃.ResultsThe calibration curve of adenosine was linear over the range of was 0.0105～0.3144μg. The correlation coefficient was 0.999 99（n=7）. The average recovery of adenosine was 100.1%, RSD=1.81% (n=6).ConclusionThe method is aurate, simple and highly repeatable.
Key words：Xuezhitong Capsule; Allium macrostemon Bunge; Adenosine; HPLC
血滞通胶囊为中药薤白的单方制剂，是由薤白经过加工制成的。薤白Allium macrostemon Bunge为百合科植物，葱属小根蒜的干燥鳞茎，主要野生于吉林、内蒙、辽宁等地，民间既作食用亦作药用。它具有理气宽胸、通阳散结之功效，中医临床广泛用于治疗胸痹，心痛彻背，脘痞不舒等症。薤白中含有大量的挥发油、腺苷、色氨酸及其衍生物和甾体皂苷等成分〔1〕。其中腺苷具有扩张冠状血管、增加冠状动脉血流量、扩张周围血管及减弱心肌收缩力的作用，同时还具有抗血小板凝集，降低全血黏度的作用，是薤白治疗胸痹等证的主要活性成分之一〔2，3〕。
1 仪器与试药
LC-2010C高效液相色谱仪（岛津），KQ-250B型超声波清洗器（江苏省昆山市超声仪器有限公司生产，功率250 W,频率40 Hz)。腺苷对照品（中国药品生物制品检定所提供，批号110879-200202），血滞通胶囊由吉林省东方制药有限公司提供。甲醇为色谱纯，冰醋酸、三乙胺等为分析纯，水为超纯水。
2 方法与结果
2.1 色谱条件色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm PN 990967-902，SNUSNH008613，LNBO5096，made in USA），流动相：0.02%的冰醋酸溶液（用三乙胺调节pH值至6.5）-甲醇（92∶8）为流动相, 流速0.9 ml/ min；检测波长：260 nm；柱温28℃；进样量20 μl。见图1～3。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备取腺苷对照品适量，精密称定，加30%甲醇溶解并稀释制成每毫升中含腺苷8 μg的溶液，作为对照品溶液。
2.2.2 血滞通胶囊供试品溶液的制备取血滞通胶囊10粒内容物，研细，精密称取1.0 g，置具塞的锥形瓶中，精密加入30%甲醇20 ml，称定重量，超声处理（功率250 W，频率40 Hz）30 min，使腺苷溶解，取出，放冷，再称定重量，用30%甲醇补足减失的重量，摇匀，取上清液，用0.45 μm微孔滤膜滤过，取滤液作为供试品溶液。
2.2.3 薤白药材供试品溶液的制备取薤白药材适量，研细，取2.0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加60%乙醇25 ml，超声处理（功率250 W，频率40 Hz）40 min，取出，放冷，以5 000 r/min离心20 min，取上清液，置50 ml量瓶中，残渣加60%乙醇25ml继续超声30 min，取出，放冷，以5 000 r/min离心20min，取上清液，合并50 ml量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，精密量取40 ml，蒸干，残渣加30%甲醇溶解并转移至10 ml量瓶中，混匀。用0.45 μm微孔滤膜滤过，取滤液作为供试品溶液。