连翘挥发油的成分分析及其药理作用的研究进展(一)
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作者：肖会敏 王四旺 王剑波 谢艳华
【摘要】 回顾了国内外对连翘挥发油的提取工艺、制备工艺、成分分析、药理作用，表明连翘挥发油具有广阔的开发前景。
【关键词】 连翘 挥发油 提取方法 包合工艺 成分 药理作用
连翘为木樨科连翘属植物连翘Forsythia suspensa(Thunb. ) Vah.l的干燥果实，具清热解毒之功效。连翘药材分为青翘与黄翘，秋季连翘果实初熟尚呈绿色时采集为青翘；秋季果实完全成熟后采集为黄翘。果实中含有丰富的挥发油， 在连翘心中含量达4％以上，平均可达3.8％〔1〕。本文对连翘挥发油的提取方法、制备工艺、成分分析及药理活性等方面综述如下。
1 连翘挥发油的提取方法
笔者〔2〕对青翘采用水蒸气蒸馏提取与超临界CO2萃取，通过正交实验确定了各自的优选条件，即前者为加水量12倍、蒸馏时间6h，粉碎度为不粉碎，优选条件收油率平均为3.07%；后者为萃取压力40MPa，萃取温度32℃，分离I压力6.6MPa，分离I温度30℃，粉碎度为2.0 mm，优选条件收油率平均为7.89%。王鹏等〔3〕采用超临界CO2萃取-分子蒸馏对连翘进行提取并分离挥发油，挥发油提取率为4.23%。王鹏等〔4〕采用超临界CO2萃取连翘挥发油通过正交实验确定的最佳条件即萃取压力解析釜I为30 MPa，温度为35℃，解析釜Ⅱ压力6.7 MPa，温度50℃，粉碎度0.55 mm，最高收率为1.18%。
2 连翘挥发油包合工艺研究
王守愚等〔5〕采用β-环糊精（β-CD) 对挥发油进行了包合实验， 确定了连翘挥发油的β-环糊精包合最佳工艺即连翘挥发油的最佳提取时间为6 h；最佳包合工艺条件为即β-CD和挥发油的比例为8∶1，包合物温度40℃，包合时间60 min。王七根等〔6〕通过3种包合方法的比较，饱和水溶液磁动搅拌法的挥发油利用率较高，研究表明使挥发油粉末化后，能增加挥发油的溶解性，降低其挥发性；稳定性考察表明，包合后能大大提高制剂的稳定性和挥发油的利用率。
3 连翘挥发油的成分分析
刘国声等〔7〕对连翘种子中挥发油成分进行了气-质色谱-计算机联用分析，又用减压分馏、柱层折等方法提取分离了连翘中挥发油的主要成分，并测定了其主要成分的百分含量，即α-蒎烯15.79％，1-β-蒎烯60.2％，伞花烃3.5％，芳樟醇6.0％。卫世安等〔8〕对连翘种子和果皮中的挥发油进行了研究，共鉴定了19个成分，含量在5％以上的主要成分是β-蒎烯、α-蒎烯和松油烯-4-醇，果皮和种子中的挥发油含量分别为0.32％~0.37％(ml/g)和3.3％~4.0％(ml/g)，两者的相对含量基本一致。徐植灵等〔9〕通过气-质联用所鉴定连翘水蒸馏成分的含量占全油的93.37%；相对百分含量超过5%的成分有β-蒎烯（29.25%）、香桧烯（19.5%）、α -蒎烯（11.85%）和松油烯-4 -醇（6.47%）。石素贤等〔10〕从连翘果实中蒸出挥发油，收油率0.2％；用毛细管气相色谱法检出23个峰、并用气-质色谱法鉴定了其中19个成分，主要成分依次是β-蒎烯(76.27％)、α-蒎烯(15.11％)、水芹烯(1.55％)、对聚伞花烯(1.20％)、芳樟醇(1.08％)等。何新新等〔11〕分析了不同产地连翘挥发油的主要成分含量存在一定差异。孙杰等〔12〕采用毛细管气-质色谱法对连翘挥发油化学成分进行了研究，经毛细管色谱分离出200多个峰，共确认了其中90种成分，所鉴定化合物的含量占全油的71.92%。用气相色谱面积归一化法测定了各成分的相对百分含量，其主要化学成分为烯烷类，各成分的质谱图与标准谱对照鉴定了90个化合物中多数为单萜、单萜醇和倍半萜类化合物。含量较多的成分有β-蒎烯、柠檬烯、孟二烯等。连翘挥发油含烯类化合物的含量占所鉴定成分含量的61.20%，烷类为17.34%，醇类为13.16%，醛类为11.88%，酯类为0.67%，检出氮化合物占全油含量1.02%，氯化合物占全油含量0.55%。郝旭亮等〔13〕比较了水蒸气蒸馏法和超临界CO2萃取法所提连翘挥发油的化学成分及其含量，结果两种方法所得挥发油主要成分基本一致，均为β-蒎烯、α -蒎烯和桧萜；4(1-异丙基)-苯甲醇和2(4-异丙基 )-苯甲醇两成分为超临界CO2萃取方法所得，其余成分两种方法均可提出，含量略有差异，并首次从连翘中得到桧萜、反-松香芹醇、香桃木醇等成分。王鹏等〔4〕通过超临界CO2萃取连翘挥发油的正交试验和GC-MS分析，从连翘挥发油的化学成分中鉴定出21种成分，并测定了其相对含量，主要成分为 α-蒎烯、β-蒎烯、萜品醇-4、α-萜品醇、苯甲醇等。武建芳〔14〕通过全二维气相色谱/飞行时间质谱对连翘挥发油进行分析研究，结果：分出约400 种组分，其中匹配度大于800的组分有220种；醇类46种，酮类41种，醛类19种，醚类13种，酸类和酯类共29种，烃类43种，含杂原子的物质有29种，其中以含氮的杂原子为主；在这220种组分中，有66种物质的体积百分含量大于0.02％，总体积含量为90.17％。用体积定量法对连翘挥发油进行了定量，结果表明单萜与单萜含氧化合物的含量较高。鉴定了56个化合物，其中多数为单萜、单萜醇和倍半萜类化合物。
4连翘挥发油的药理作用
马振亚等〔15，16〕药理实验证明连翘挥发油抗菌抑病毒作用，对流感病毒感染小鼠有保护作用；在鸡胚内能抑制流感病毒亚甲型、副流感仙台株的增殖。卫世安等〔8〕药理实验证明连翘挥发油对金黄色葡萄球菌、肺炎双球菌、白色念珠菌有明显的抑制作用。魏希颖等〔17〕利用滤纸片法观察到不同浓度连翘种子挥发油对啤酒酵母、产黄青霉以及黑曲霉的有很好的抑制作用，其最小杀菌浓度即啤酒酵母为3.91×10-6ml・ml-1，产黄青霉为7.81×10-6 ml・ml-1，黑曲霉为3.13×10-5ml・ml-1；发现连翘种子挥发油对猪油具有促进其氧化的作用。郭际等〔18〕探讨了连翘挥发油抗炎作用，连翘挥发油0.24 ml・kg-1，0.12 ml・kg-1有明显的抑制二甲苯所致小鼠的耳廓肿胀作用；连翘挥发油0.24 ml・kg-1有明显的对抗小鼠腹腔毛细血管通透性亢进的作用，而0.12，0.06 ml・kg-1对小鼠腹腔毛细血管通透性亢进也有一定的对抗趋势，但与模型对照组比较，组间无显著性差异；连翘挥发油0.24，0.12 ml・kg-1有明显的抑制大鼠角叉菜胶性足肿胀的作用；连翘挥发油0.24 ml・kg-1对角叉菜胶所致的大鼠胸膜炎模型有一定的抑制作用；连翘挥发油0.24 ，0.12 ml・kg-1对油酸所致的大鼠急性肺损伤模型有一定的抑制作用；连翘挥发油0.24 ml・kg-1有明显的抑制大鼠棉球肉芽形成的作用。证实连翘挥发油具有抗炎作用，其作用机理与抑制炎症介质PGE2和组胺、五胺色胺的释放有关。魏希颖等〔19〕运用普通营养琼脂和M-H琼脂两种培养基评价了不同浓度的连翘挥发油的抑菌作用；发现连翘挥发油在M-H 培养基上抑菌效果优于普通培养基，且对金黄色葡萄球菌抑菌效果较为显著。连翘挥发油中主要成分为β-蒎烯、a-蒎烯，实验证明β-蒎烯具有抗大肠杆菌O157作用〔20〕，对回肠具有解痉挛〔21〕、抗炎、抗氧化作用和雌激素样活性〔22〕，具有抑制局部膜电位作用〔23〕；α-蒎烯具有抑制白色念珠菌胞壁中的几丁质、多糖及胞膜上麦角固醇和核酸DNA及RNA的生物合成而达到杀菌作用〔24，25〕。周建娅等〔26〕探讨了α-蒎烯对人单核细胞THP-1细胞株核因子-кB (NF-кB)核转位活化的影响，发现①a-蒎烯预处理可预防性抑制LPS刺激引起的NF-кB核转位活化，且呈剂量依赖性；②免疫荧光标记技术结合激光扫描共聚焦显微检测方法，可以从形态学上直接观察细胞中NF-кB活性状态。