PRDM1基因在喉癌组织中表达的研究及临床意义(一)
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作者：王洪江，李培华，刘稳，许学谷
【摘要】 目的 以喉鳞状细胞癌组织为研究对象，探讨抑癌基因PRDM1对喉癌发生、发展的作用及其临床意义。方法 用免疫组织化学SP法检测38例喉癌组织及同期12例患者声带息肉组织中PRDM1蛋白的表达，对喉癌中PRDM1在不同原发部位、病理分级、临床分期及淋巴结转移的表达情况进行统计学分析。结果 PRDM1在声带息肉中的阳性表达率(10/12，83.3%)明显高于喉癌组织中阳性表达率(17/38，44.7%)，经分析其差异有统计学意义(P0.05)。喉癌组织中PRDM1的阳性表达率与临床分期及颈部淋巴结转移有相关性(P0.05)，与原发部位及病理分级无相关性(P>0.05)。结论 喉癌的发生与抑癌基因PRDM1的失活有关，因此PRDM1可能成为喉癌早期诊断、研究基因治疗及判断预后的重要靶基因。
【关键词】 喉癌；PRDM1；免疫组化
Abstract: Objective To investigate the role and clinical significance of the expression of PRDM1 gene in the carcinogenesis and progression of laryngeal squamous cell carcinoma (LS). Methods The expression of PRDM1 was detected by immunohistochemistry method in 38 cases of LS and 12 cases of vocal cord polyp, and the expression of PRDM1 was analyzed in LS with different primary sites, pathological grades, TNM staging and lymph node metastasis. Results The positive expression rate of PRDM1 in vocal cord polyp (83.3%) was obviously higher than that in LS (44.7%), which had significant statistical difference (P0.05). There was a positive correlation between PRDM1 expression and TNM staging and lymph node metastasis (P0.05), while there was no correlation with primary sites and pathological grade (P>0.05). Conclusion The inactivation of PRDM1 is correlated with the carcinogenesis and progression of laryngeal carcinoma. PRDM1 may be a vital target gene for early diagnosis, gene therapy and prognosis of LS.
喉癌是头颈部肿瘤中较为常见的恶性肿瘤，它的发生目前认为是多种因素综合作用的结果，研究初步证实喉癌的发生与遗传突变有关，并且常表现为一系列基因的突变，如癌基因活化以及抑癌基因的失活。由于基因调控信号的异常，使细胞的生长调控机制紊乱，从而造成细胞恶变形成恶性肿瘤。近年来随着遗传学及分子生物学的发展，已经研究了多种与喉癌发生有相关性的基因，如Cyclin D1、P16、PTEN、Survivin等。
本研究应用免疫组化方法检测38例患者喉鳞癌及同期12例患者声带息肉中PRDM1蛋白的表达情况，并分析它们与喉癌不同病理特征的关系，在此基础上探讨其在喉癌发生发展中可能的作用机制及临床意义。
1 资料和方法
1.1 临床资料 喉癌组织标本均取自2007年4月至2008年4月在我科接受手术治疗的原发性喉癌患者，每例患者术前均未经放、化疗且均经病理证实。其中男36例，女2例；年龄45～74岁。原发部位：声门上型8例，声门型30例；病理分级：高分化17例，中分化14例，低分化7例；TNM分期（按照UI1997国际分期标准）：Ⅰ期3例，Ⅱ期18例，Ⅲ期10例，Ⅳ期7例；淋巴结转移：有颈淋巴结转移26例，无颈淋巴结转移12例。同期取12例手术切除的声带息肉作对照研究。
1.2 试剂 PRDM1单克隆抗体（Mouse Monoclonal anti-Blimp-1）购自美国NOVUS公司，工作浓度为1∶100。二抗试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司。
1.3 免疫组化染色 所有标本离体后，立即放入液氮罐中储存，然后放入-80℃冰箱中。均经常规石蜡包埋，4 μm连续切片，使用S-P法进行染色。标本脱蜡、水化，微波抗原修复，DAB显色，苏木精复染，分化、返蓝，梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封闭。PBS缓冲液做阴性对照，试剂公司提供阳性对照。
1.4 免疫组化结果判定标准 以细胞核或（和）细胞质出现棕黄色或棕褐色物质为阳性。按照参考文献〔1〕标准，阳性细胞计数方法为：每张切片随机观察5个高倍视野，每个视野计数200个细胞，以阳性细胞计数≤10%为阴性，10%～30%为阳性，≥30%为强阳性。
1.5 统计学处理 统计分析由SPSS13.0软件完成。率的比较用Pearson χ2检验，P0.05时有统计学意义。
2 结 果
2.1 喉癌及声带息肉组织中PRDM1蛋白的表达免疫组化染色显示， PRDM1的阳性表达主要位于细胞的细胞质内。在喉癌中表达阳性率为44.7%(图1)，在声带息肉中的表达阳性率为83.3%(图2)，统计学分析其差异有统计学意义（P0.05）。