灵芝水煎剂对应激小鼠血清胰岛素样生长因子(一)
详细内容
作者：左永昌，唐和生，彭菲，刘宗生，文安华，刘继志
【关键词】 灵芝；束缚应激；胰岛素样生长因子
Effect of aqueous extract from Ganoderma Lucidum on levels of serum insulinlike growth factorI in restraint stressed mice
【Abstract】 AIM: To investigate the effect of aqueous extract from Ganoderma Lucidum on levels of serum insulinlike growth factorI (IGFI) in restraint stressed mice. METHODS: The different doses of aqueous extract from Ganoderma Lucidum were given orally for 10 d in mice before restraint stress, and its serum IGFI was assayed by using the radioimmunoassay (RIA) after restraint stress for 20 h. RESULTS: The level of serum IGFI in restraint stressed mice given aqueous extract from 8 g/（kg?d）Ganoderma Lucidum before restraint stress was increased by 32% as pared with that in restraint stress control group (P0.01). CONCLUSION: Taking orally aqueous extract from Ganoderma Lucidum could resist the decrease of serum IGFI due to restraint stress in mice, and could prevent or alleviate damages aroused by the restraint stress in mice.
【Keywords】 Ganoderma Lucidum; restraint stress; insulinlike growth factorI
【摘要】 目的： 探讨灵芝水煎剂对束缚应激小鼠血清胰岛素样生长因子I(IGFI)含量的影响. 方法： 以不同剂量的灵芝水煎剂给应激前的小鼠灌胃10 d，应激20 h后用放射免疫分析法（RIA）测定其血清IGFI的含量. 结果： 束缚应激前以8 g/（kg?d）灵芝水煎剂灌胃的小鼠，束缚应激期间血清IGFI含量比单纯应激小鼠增加了32% (P0.01). 结论： 口服灵芝水煎剂有对抗应激所致的血清IGFI含量下降的作用，能预防或减轻应激给机体带来的危害.
【关键词】 灵芝；束缚应激；胰岛素样生长因子I
0引言
灵芝自古被列为“扶正固本”、“滋补强壮”的精品药物，现代医学研究也证实灵芝对机体生理功能的影响有“扶正固本”式的调节作用，如平衡机体过强或过低的免疫功能〔1〕. 显然，这种调节作用对治疗以激素失衡和生理功能紊乱为主要特征的应激来说，可谓针锋相对、对症下药. 我们曾观察到束缚应激小鼠血清胰岛素样生长因子I（IGFI）含量明显减少〔2-3〕，本实验我们观察了灵芝水煎剂对应激小鼠血清IGFI含量的影响.
1材料和方法
1.1材料Balb/c纯系雌、雄性小鼠，鼠龄6~8 wk，体质量22~26 g，北京大学医学部动物中心提供. 羊抗兔IgG为北京大学医学部免疫研究中心自制品，人基因重组胰岛素样生长因子I(rhIGFI)和多克隆IGFI抗血清购自Promega公司，Na125I为中科院上海原子能研究所产品，硫酸鲱鱼精蛋白（纯度100%, Prolamine）和Iodogen购自Sigma公司. 灵芝（赤芝）购自北京同仁堂，产地山东，常规水煎2次，两次药液经纱布过滤后混合并浓缩至1 g生药/1 mL, 4℃保存，用时以生理盐水稀释.
1.2方法
1.2.1动物分组实验小鼠随机分成17组，每组10只. 正常对照组小鼠饲养方法不变；单纯应激组小鼠不喂药，但每天加喂生理盐水1次，每次0.4 mL，连续10 d；应激前喂药组和喂药后不应激组分别以4 g/（kg?d）, 8 g/（kg?d）, 16 g/（kg?d）三个不同剂量的灵芝煎剂灌胃，1次/d，每次0.4 mL，连续10 d. 应激前喂药组小鼠分别于应激期和应激后第3日、第6日、第12日进行血清IGFI含量测定，分析其变化情况.
1.2.2小鼠应激与血清制备灵芝灌胃10 d后分别将小鼠束缚于特制笼中20 h，眶静脉取血，血液置4℃冰箱中凝固4~6 h后低速离心分离血清.
1.2.3小鼠血清IGFI含量放射免疫分析Iodogen法制备125IrhIGFI,标记率45%，比放射性125147 uCi/ug. 实验参照Mohan等〔4〕描述的方法，以logitB/BO法作标准曲线并求出各样品IGFI的含量. 抗清和方法学的质量控制:抗体特异性经双向免疫扩散法测定，与家兔血清无交叉反应；BO变异系数分析结果为批内CV 2.31%，批间CV 3.90%；最小可测剂量按零标准平均B%减去两倍批内CV计算，最小检出值为7.50 pg/ml；回收试验： 按标准曲线制作程序，将不同量标准品加入反应体系中的5次回收试验，回收率平均为96%. 此外，RIA 缓冲液配制中以Tween20代替小牛血清，以避免血清中含有IGFI. 实验和γ计数使用北京大学医学部免疫研究中心603室、北京大学医学部人类疾病基因研究中心的现有设备.
统计学处理： 用统计软件SPSS10.0进行统计分析，计量数据以x±s表示，两两比较用t检验，P0.05有统计学意义.
2结果
2.1灵芝对应激期间小鼠IGFI含量的影响单纯应激组小鼠血清IGFI含量（68.0±3.3 ng）比正常对照组小鼠（129.0±2.6 ng）减少了47%（表1）；应激前每天每只用8 g/kg以上灵芝灌胃的小鼠，应激后的血清IGFI含量均比单纯应激小鼠的血清IGFI含量明显增加，其中应激前每天每只用8 g/kg灵芝灌胃的应激小鼠血清IGFI含量（90.0±2.9 ng）比单纯应激的小鼠血清IGFI含量增加了32%（P0.01）；给予灵芝灌胃而不进行应激的小鼠血清IGFI含量比正常小鼠略有增加，但无统计学差异（P0.05).