麻黄碱手性异构体与胆酸同系物单用及配伍拮抗组胺刺激豚鼠离体气管片收缩的药理作用研究(一)

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作者：李红宇，吕新怀，丁日高，张天宏，赵建，杜先林

【摘要】 目的 基于胆麻片的原理，评价各种麻黄碱异构体及胆酸同系物拮抗组胺刺激豚鼠离体气管片收缩的作用，从中筛选出各系化合物作用较强的单体，并比较两种药物单用及配伍的作用强弱，以期达到增强药效减少副作用的目的，为抗哮喘新药开发提供实验依据。方法 在组胺刺激豚鼠离体气管片收缩模型上，用Med-lab-u/4cs生物信号辨集处理系统记录加药后气管张力的变化，比较麻黄碱不同手性异构体与胆酸同系物单用及配伍对组胺的拮抗作用。结果 右旋麻黄碱和去氧胆酸对组胺的拮抗作用较强。根据两者的ED50，右旋麻黄碱和去氧胆酸按4:1比例配伍与两者单用比较，药理作用增强，量效曲线左移。结论 两者合用有协同作用，提示两者合用治疗支气管哮喘可降低麻黄碱的剂量，从而降低副作用。

【关键词】 右旋麻黄碱；去氧胆酸；离体实验

【Abstract】 Objective To find evidences for a new bination of 1S，2R-（+） Ephedrine hydrochloride and Deoxycholic acid in the treatment of asthma.Methods Med-lab-u/4cs system was used to record the changes of the strain of guinea pig tracheal after drug administration, and the antagonistic effects of the two isomers of both ephedrine and psudoephedrine, and deoxycholic acid, when used alone or in bination, against the constriction of the guinea pig tracheal induced by histamine. Results 1S，2R-（+） Ephedrine hydrochloride and Deoxycholic acid were the strongest antagonists as pared to the others. The bination of 1S，2R-（+） Ephedrine hydrochloride and Deoxycholic acid, at ratio of 4:1 corresponding to the ED50 of them, was more effective than the two ponents alone in that the dose-effect curve of the bination was shifted to the left pared to that of the ponent alone. Conclusion The bination of 1S，2R-（+） Ephedrine hydrochloride and Deoxycholic acid might be more effective than both the ponents when used alone. It indicates that the bination of the two drugs might be of some value for further development.

【Key words】 1S，2R-（+）Ephedrine hydrochloride; Deoxycholic acid; In vitro experiment

哮喘是一种以气道慢性炎症、气道高反应性和气道阻塞为特征的疾病〔1〕，它的发生受遗传因素和环境因素的共同影响。近年来，哮喘发病率和死亡率呈持续增加趋势〔2〕。

目前常用的平喘药有三类：（1）支气管扩张药，如长效β2受体激动剂、抗胆碱药、缓释茶碱；（2）抗炎性平喘药, 如糖皮质激素、白三烯调节剂；（3）抗过敏平喘药，如色甘酸钠。上述治疗药物能有效减轻哮喘患者症状和气道炎症，但不能根治，长期使用就会产生耐受，而且对于有些哮喘如激素抵抗性哮喘和重症哮喘，上述药物疗效欠佳，因此，临床上需要研制一些其他治疗哮喘的药物作为对上述治疗的补充。近年来研究发现一些中药如黄芪、丹参、麻黄、防风、广地龙、桃仁、甘草等合用治疗哮喘具有改善哮喘患者免疫功能，缓解气道炎性反应的作用〔3〕。

本实验基于防治哮喘的传统中药珠贝定喘丸〔4〕（含牛黄、珍珠、川贝、麻黄等）和胆酸最新研究成果〔5〕，探讨我院申请的新药“胆麻片”方中主要成分胆酸各种同系物和麻黄碱四种手性异构体拮抗组胺刺激豚鼠离体气管片收缩的作用强弱，并比较作用较强的胆酸同系物和麻黄碱手性异构体单用及合用拮抗组胺刺激豚鼠离体气管片收缩的作用强弱，以期达到增强药效减少副作用的目的，为抗哮喘新药开发提供实验依据。

　　1 材料与方法

1.1 材料 豚鼠，雄性，体重250～300g，购自军事医学科学院实验动物中心。Med-lab-u/4cs生物信号辨集处理系统，南京美易科技有限公司生产。组胺，购自上海国药集团化学试剂有限公司，纯度≥98%。麻黄碱及伪麻黄碱的手性异构体，均购自赤峰艾克制药科技股份有限公司，纯度均≥98%。胆酸同系物（胆酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸），均购自Sigma公司，纯度≥97%。

1.2 实验方法

1.2.1 豚鼠气管片制备及描记方法〔6〕 （1）豚鼠气管片制备：取雄性豚鼠，体重250～300g，击毙后立即在腹面正中切开颈部皮肤和皮下组织，仔细分离出气管，自甲状软骨下至气管分叉处剪下全部气管，放入盛有K-H氏液的平皿中，剪除气管周围结缔组织。在气管软骨面纵行剪开气管，再以3～4个软骨环的间隔横行剪断，取其中4片，辨用气管单片进行描记。（2）描记方法：将标本放入盛有K-H氏液的离体器官浴槽内，下端以丝线固定于钢丝钩，上端以丝线连接至拉力换能器，辨用Med-lab-u/4cs生物信号辨集处理系统进行数据辨集。浴液温度恒定在37.2℃，持续供氧，初始负荷调节在1.0～1.2g。标本平衡30min左右，20min时换液一次，当基线稳定后开始给药。①基线稳定后加入组胺，终浓度8μg/ml，作用5～8min，记录气管片的收缩幅度（图1，a段）。②用K-H氏液冲洗3～4次，基线稳定后加入不同浓度的受试药物，作用15min，记录气管片的舒张幅度（图1，b段），之后加入组胺（终浓度8μg/ml），记录气管片的收缩幅度（图1，c段）。③用K-H氏液冲洗3～4次，基线稳定后加入组胺（终浓度8μg/ml），作用5～8min，记录气管片的收缩幅度（图1，d段）之后加入不同浓度的受试药物，作用15～20min，记录气管片的舒张幅度（图1，e段）。

注：a：基线稳定后加入组胺张力增加值；b：用K-H氏液冲洗基线稳定后加入受试药物张力下降值；c：受试药物作用张力稳定后再加组胺的张力增加值；d：用K-H氏液冲洗基线稳定后加入组胺的张力增加值；e：组胺作用张力稳定后加入受试药物后张力下降值。

1.2.2 观察指标及计算方法 （1）药物对组胺所致气管片收缩的预防作用，以抑制率表示，抑制率=（a-c）/a 。（2）药物对组胺所致气管片收缩的治疗作用，以舒张率表示，舒张率=e/d，见图1。

1.3 统计学分析 麻黄碱不同手性异构体及胆酸同系物的药理作用比较采用单因素k水平方差分析，显著性水平为0.05。量效曲线拟合采用OriginPro 7.0 S形曲线拟合。配伍实验相互作用分析采用映射法。