HPLC法测定不同采收期小叶榕叶中异牡荆苷的含量(一)
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【摘要】 目的 建立小叶榕叶中异牡荆苷的含量测定方法，并比较不同采收期小叶榕叶的异牡荆苷的含量差异。方法 用HPLC法进行测定，流动相为甲醇?水（38∶62），检测波长为270 nm。结果 不同采收期药材异牡荆苷最高含量达0.69％，最低为0.18％，7～12月份含量明显高于其他月份。结论 该方法简便，准确，重复性好，适于小叶榕叶中异牡荆苷的含量测定。
【关键词】 高效液相色谱法；小叶榕叶；异牡荆苷；采收期
Abstract:Objective To develop a quantitative method to determine isovitexin in Folium Fici Microcarpae, and to pare the content of isovitexin in Folium Fici Microcarpae of different growth stages.Methods HPLC method was used by using MeOH?H2O (38∶62) as mobile phase. The detection wavelength was at 270 nm.Result The highest content of isovitexin from different growth stages was 0.69%, and the lowest was 0.18%. The contents in 7-12 moths were significantly higher than other months. Conclusion This method was simple, quick and aurate for determination of isovitexin in Folium Fici Microcarpae.
Key words:HPLC; Folium Fici Microcarpae; isovitexin
小叶榕叶Folium Fici Microcarpae，又名小榕叶、落地金钱，来源于桑科榕属植物榕树（Ficus microcarpa L.f.）的叶。小叶榕叶为民间常用中草药，其味淡，性凉，具有清热发表、解毒消肿、祛湿止痛的功效〔1〕。用于治疗哮喘和慢性支气管炎，在治疗心血管疾病、抗炎、抑菌等方面也都有显著的效果〔2〕。其中主要含黄酮、三萜类和甾体化合物等化学成分〔3〕。小叶榕叶中的黄酮类成分主要为异牡荆苷（另文报道）。本实验采用HPLC法，建立了小叶榕叶中异牡荆苷的含量测定方法。该方法操作简便、快速、重现性好，适用于本品的质量控制。
1 仪器与试药
美国Waters高效液相色谱仪：Waters 600型泵，2487型紫外检测器，Empower工作站。赛多利斯电子天平。
小叶榕药材采自广州，在一年中各月份分别采集，所有样品由广东药学院房志坚副教授鉴定为桑科榕属植物小叶榕Ficus microcarpa L.f.的叶。对照品异牡荆苷为自制，经UV、氢谱、碳谱鉴定（另文报道），并利用HPLC归一化法分析其纯度达99.48%。甲醇（色谱纯，天津科密欧公司），其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2．1 色谱条件
Gracesmart C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇?水（体积比38∶62）；柱温：25 ℃；流速：1.0 mL/min；检测波长：270 nm；进样量：20 μL。
2．2 对照品溶液的制备
取异牡荆苷对照品适量，精密称定，以体积分数50％甲醇溶解，配制成每1 mL含异牡荆苷21.6 μg的溶液，以此作为对照品溶液。
2．3 供试品溶液的制备
取本品粉末（过20目筛）约1 g，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入体积分数50％甲醇50 mL，称定重量，加热回流40 min，放冷，再称定重量，以体积分数50％甲醇补足减失的重量，摇匀，过滤，精密量取续滤液10 mL，通过聚酰胺柱（60～80目聚酰胺约2 g，装于内径1.5 cm的小柱），以体积分数50％甲醇洗脱，洗脱液收集于100 mL量瓶，并以洗脱液定容至刻度，摇匀，即得。
2．4 线性关系考察
分别精密量取“2．2”项下对照品溶液0.25，0.5，1.0，2.0，3.5，5.0和10.0 mL置10 mL量瓶，加体积分数50%甲醇稀释至刻度，按上述色谱条件进样，测定峰面积，分别为11 565、21 718、44 185、88 508、153 526、221 861、458 014，依峰面积（A）与质量浓度（ρ）绘制标准曲线，所得回归方程为A=21 171ρ-2 585.1，r=0.9996，表明异牡荆苷质量浓度在0.54～21.6 μg・mL-1范围内线性关系良好。