黄柏中盐酸小檗碱在不同复方中提取率的考察(一)

详细内容

【摘要】 　　目的考察黄柏中的盐酸小檗碱在不同复方中的提取率。方法按照部颁标准各品种项下的制备工艺进行提取，高效液相色谱（HPLC）法测定黄柏中盐酸小檗碱的含量。结果黄柏中的盐酸小檗碱在不同复方中提取率不同，在所考察的6个复方中提取率分别为：17.13%，12.51%，7.91%，8.56%，12.61%，23.06%。结论黄柏中盐酸小檗碱在不同复方中的提取率均偏低，有必要对其工艺进一步改革，优化工艺参数，提高药品质量。

【关键词】 黄柏 盐酸小檗碱 提取率

　　黄柏为常用中药之一，具有清热燥湿、泻火解毒的功效，在以清热作用为主的复方制剂中应用较多。黄柏树皮中含有多种生物碱，主要为小檗碱，其次为巴马亭、木兰花碱、黄柏碱、药根碱、康迪辛碱等。另含苦味质黄柏酮、黄柏内酯、白藓内酯、β及γ-谷甾醇、7-去氢豆甾醇、脂肪油及黏液质等。在以黄柏为主药的复方中，目前多以盐酸小檗碱的含量作为质控指标。但笔者在研究过程中发现，黄柏中的盐酸小檗碱在不同复方中的提取率有较大差异，考虑到可能是复方配伍后对小檗碱溶出率的影响所致。为了验证这一假设，选择《部颁标准》收载品种中以黄柏为主要药味，且提取工艺均为水提的6个复方，对其盐酸小檗碱的提取率进行了考察，为今后《部颁标准》收载品种进行工艺改进、提高药品质量提供参考依据。

　　1 仪器与试剂

　　1.1 仪器

　　Waters 600E高效液相色谱仪，Waters 600泵，Waters 2487紫外检测器，Millennium32色谱工作站。

　　1.2 试剂甲醇、乙腈均为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为双蒸水。所用药材购于陕西省咸阳市药材公司。

　　2 方法

　　2.1 黄柏药材的含量测定取黄柏药材3份，每份0.1 g，精密称定，置100 ml量瓶中，分别精密加入乙腈-0.1% 磷酸溶液（50∶50）（每100 ml加入十二烷基磺酸钠0.1 g）80 ml，超声提取40 min，放冷，用乙腈-0.1%磷酸溶液（50∶50）稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。按《中国药典》2005年版一部黄柏项下的含量测定方法，精密吸取对照品溶液、黄柏药材溶液10 μl，注入液相色谱仪中，测定，结果盐酸小檗碱含量分别为59.8，61.3，61.9 mg/g,平均含量为61.0 mg/g。

　　2.2 黄柏药材水提液中盐酸小檗碱的含量称取黄柏药材30 g，粉碎成粗粉，加10倍量水煎煮3次，2 h/次，提取液趁热过滤，滤液浓缩至200 ml，备用。

　　按文献方法〔1〕，精密吸取对照品溶液5 μl，供试品溶液10～15 μl，注入液相色谱仪中，测定，计算盐酸小檗碱的含量及提取率。结果见表1。结果表明，黄柏水提工艺中盐酸小檗碱的提取率为8.29％。表1 黄柏水提液中盐酸小檗碱的提取率提取次数盐酸小檗碱含量C/mg・ml-1提取率（略）

　　2.3 不同复方中盐酸小檗碱的提取率

　　2.3.1 盐酸小檗碱含量测定方法的建立色谱条件：色谱柱为十八烷基硅胶键合相；检测波长265 nm；流动相为乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液（用磷酸调pH值至3.0）（30 ∶70）；柱温为常温； 流速1 ml/min。

　　供试品的制备：精密吸取提取液3ml，加甲醇定容至50ml，滤过，取续滤液，即得。

　　对照品的制备：精密称取盐酸小檗碱2.1mg，加甲醇定容至100 ml，制成0.021 mg/ml的对照品溶液。

　　线性关系的考察：精密吸取盐酸小檗碱对照品溶液(0.068 mg・ml- 1 )，分别进样2.5，5，7.5，10，12.5，15 μl，以进样量(μg) 为横坐标(X)，峰面积为纵坐标( Y) ,绘制标准曲线，计算得回归方程为:Y= 4 578.22X - 28.86，r = 0.999 9。