枸杞对D?半乳糖致衰老小鼠学习记忆影响(一)

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【摘要】 目的 观察枸杞对D-半乳糖所致衰老小鼠学习记忆的影响。方法 建立D-半乳糖致衰老小鼠模型，跳台实验检测其学习记忆能力，同时测定其大脑乙酰胆碱酯酶(AchE)活性，用黄嘌呤氧化酶法测定大脑超氧化物歧化酶(SOD)活性，硫代巴比妥法测定大脑丙二醛(MDA)含量，观察小鼠服用枸杞汁后上述指标变化。结果 与D-半乳糖模型组比较，各实验组均可提高小鼠的学习记忆能力(P＜0.05或P＜0.01)，显著增加D-半乳糖所致衰老小鼠大脑SOD活性、降低MDA含量(P＜0.05或P＜0.01)，可显著升高大脑AchE活性(P＜0.05，或P＜0.01)。结论 枸杞能改善D-半乳糖所致衰老小鼠的学习记忆功能，其机制可能与枸杞的抗氧化自由基作用有关。

【关键词】 枸杞

　　阿尔茨海默病(AD)是一种渐进性神经退行性疾病，其发病有增加的趋势〔1〕。枸杞(Fructus lycii)是我国传统的药材，它含有丰富的营养成分和药理活性成分。现代医学已证实，枸杞可调节免疫、延缓衰老和清除自由基等功能。本实验采用D?半乳糖所致衰老小鼠模型，研究AD小鼠学习记忆能力、脑组织乙酰胆碱酯酶(AchE)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量的变化及枸杞对这些指标的影响，并分析其作用机制，为临床应用提供理论依据。

　　1 材料与方法

　　1?1 试验动物及分组 昆明小鼠雄性75只，体重(24g±2)g(包头医学院动物室)。随机分为5组，每组15只，即对照组，D-半乳糖模型组，低、中、高3个枸杞汁剂量组。饲养过程中对照组和模型组各死亡3只，枸杞汁剂量组各死亡2只。

　　1?2 药物与仪器 枸杞(包头市奇力康医药公司)。D-半乳糖(上海源聚生物科技有限公司，批号030406)。AchE试剂盒、SOD试剂盒、MDA试剂盒(南京建成生物工程研究所)。752C紫外-可见分光光度计、721型分光光度计(上海第三分析仪器厂)。STT-2型跳台仪(中国医科院药研所)；德国来卡2135型切片机、加样器(上海伟业有限公司)。离心机(北京医用离心机厂)；混匀器(上海伟业有限公司)。

　　1?3 D-半乳糖模型及给药方法 除对照组给予生理盐水外，其他组每日均腹腔注射0?12g/(kg?bw)的D?半乳糖，给药体积10ml/(kg?bw)。枸杞组同时灌胃给予高剂量(1?5g/ml)、中剂量(0?75g/ml)、低剂量(0?375g/ml)，对照组和模型组灌胃给予等容积的生理盐水，连续6周。枸杞汁制备：以枸杞子总体积的5倍量自来水冷浸3h，微沸1h×2次，合并滤液，文火浓缩制成，无菌条件下装瓶，置4℃冰箱备用。

　　1?4 方法

　　1?4?1 跳台实验 造模后灌胃至4周后1h开始跳台实验〔2〕。

　　1?4?2 AchE、SOD、MDA的测定 小鼠脑组织AchE活性用试剂盒方法；SOD活力采用黄嘌呤氧化酶法；MDA含量采用(TBA)法；脑组织蛋白质定量采用考马斯亮蓝(CBB-SDS)法。

　　1?5 统计分析 采用SPSS10?0软件进行t检验。

　　2 结果

　　2?1 枸杞对小鼠跳台成绩的影响(表1) D?半乳糖所致模型组，无论学习成绩和记忆成绩，与对照组比较，模型组小鼠的错误次数明显增多(P＜0?01)，学习成绩的反应期明显延长(P＜0?01)，记忆成绩的潜伏期明显缩短(P＜0?01)；与模型组比较各给药组小鼠学习记忆障碍有明显的改善(P＜0?05或P＜0?01)；各用药组间比较以枸杞汁中剂量作用最为明显，但枸杞汁低、中、高剂量组间差异无统计学意义(P＞0?05)。