PTTG， c-myc和p53在非小细胞肺癌中的表达及意义(一)
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【摘要】 目的： 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中PTTG,c-myc和p53的表达及其与NSCLC发生发展之间的关系。方法： 用免疫组化法测定60例NSCLC标本及27例正常肺组织中PTTG， c-myc和p53的表达。结果： NSCLC组织细胞中PTTG， c-myc和p53的阳性表达率明显高于正常肺组织（P0.01）。在不同组织学类型间阳性表达率差异无统计学意义（P>0.05），PTTG和c-myc在不同分化程度肺癌间的阳性表达率差异有统计学意义（P0.05），淋巴结是否转移PTTG和c-myc的阳性表达率差异也有统计学意义（P0.05）。PTTG与c-myc, PTTG与p53阳性表达率呈显著正相关（P0.01），c-myc与p53阳性表达率也呈显著正相关（P0.05）。 结论： PTTG, c-myc和p53在NSCLC中有较高表达，有可能作为评估预后、指导治疗的指标。
【关键词】 非小细胞肺癌； 垂体肿瘤转化基因； c-myc； p53
〔Abstract〕 Objective: To investigate the relationship between the expression of PTTG,c-myc and p53 and their role in ourance and development of non-small cell lung carcinoma. Methods： The expression of PTTG, c-myc and p53 was detected immunohistochemistrically in 60 cases of non-small cell lung carcinoma and 27 cases of normal lung tissue. Results： There was an extensive expression of PTTG, c-myc and p53 in tumor cell（P0.01）; difference was not found in groups of histology（P>0.05）. The expression of PTTG and c-myc in tumor cell was both correlated with differentiated degree of lung cancer(P0.05); in non-small cell lung carcinoma with lymph node metastasis， there was a significant difference(P0.05); the positive expression of PTTG,c-myc and PTTG, p53 in non-small cell lung carcinoma had a striking positive correlation respectively(P0.01). The positive expression of c-myc and p53 also had a striking positive correlation(P0.05). Conclusion： The results indicate that PTTG,c-myc and p53 participate in ourrence and development of non-small cell lung carcinoma, and it may be the index of the prognosis appraisal and the therapeutic guidance.
〔Key words〕 non-small cell lung carcinoma; pituitary tumor transforming gene(PTTG); c-myc; p53
目前，肺癌已是我国死亡率最高的恶性肿瘤。非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)占所有肺癌的60%～80%。由于肺癌的早期浸润和转移，预后较差。近年来人们对NSCLC的发病机制及其特异因子表达的研究在不断深入, 以期寻找有效的早期诊断及治疗靶点。本实验检测了垂体肿瘤转化基因（pituitary tumor-transforming gene,PTTG）,c-myc和p53在NSCLC中的表达，旨在探讨三者之间及与NSCLC发生发展的关系。
1 材料与方法
1.1 材 料
标本随机取自江苏大学附属人民医院胸外科2004年1月～2006年12月间经肺部手术切除的存档蜡块87例，NSCLC 60例，正常对照肺组织27例；其中鳞癌34例，腺癌26例；高分化、中分化、低分化分别为14,21,25例；男36例，女24例；年龄38～76岁，平均57.5岁。所有病例均作淋巴结检测，其中转移者28例。所有研究对象术前均未接受放疗、化疗。
1.2 实验方法
免疫组化采用EnVisionTM法。主要试剂：EnVision免疫组化试剂盒为DAKO公司产品，羊抗人PTTG抗体和鼠抗人p53抗体为Santa Cruz产品，鼠抗人c-myc抗体购自北京中山生物技术有限公司，多聚赖氨酸、PBS、柠檬酸缓冲液均购自福州迈新生物技术公司。操作严格按照说明书规定进行。购买抗体公司提供的阳性片作为阳性对照，PBS代替一抗作阴性对照。
1.3 结果判断
PTTG和c-myc蛋白阳性反应为细胞质和细胞核出现棕黄色或棕褐色颗粒, p53蛋白阳性反应为细胞核内出现棕黄色或棕褐色颗粒。采用染色指数法计算阳性结果，综合考虑阳性细胞百分数和染色强度两个方面。在100倍显微镜下随机选取5个高倍视野，计算肿瘤细胞中阳性细胞百分数，将阳性细胞百分数在0%～5%之间转换为0分，5%～25%转换为1分，26%～50%转换为2分，51%～75%转换为3分，76%以上转换为4分；染色强度计算方法，肿瘤细胞不着色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分，如在同一病变中存在不同评分标准的视野，则取最大值和最小值的平均值作为其染色指数评分。上述两项之和即为该肿瘤细胞的染色指数评分，染色指数0～2分定义为阴性表达，3～7分定义为阳性表达。
1.4 统计学处理
应用SPSS11.0软件进行卡方检验和Spearman等级相关分析，P0.05为有统计学意义。
2 结果
2.1 PTTG, c-myc和p53在肺癌组织中的表达
PTTG， c-myc和p53在肺癌组织中表达较为广泛。PTTG和c-myc阳性颗粒位于细胞质、细胞核，呈棕黄或棕褐色。肺鳞癌中PTTG 和c-myc 主要表达在细胞核， PTTG 和c-myc在腺癌中主要分布在细胞质。癌组织中阳性细胞呈弥漫性、巢状分布。肺癌组织p53阳性颗粒位于细胞核内，为棕黄色至棕褐色，阳性细胞呈弥漫性、局限性或散在性分布。PTTG, c-myc和p53蛋白在肺癌组织中的阳性表达率均高于正常肺组织（P0.01），见表1。
表1 PTTG, c-myc和p53在NSCLC及正常肺组织中的表达（略）
Tab 1 Expression of PTTG, c-myc and p53 in non-small cell lung carcinoma and normal lung tissue
2.2 PTTG, c-myc和p53的表达与NSCLC临床病理特征的关系
经χ2检验,PTTG, c-myc和p53在肺鳞癌细胞、腺癌细胞中的阳性表达率差别无统计学意义（P>0.05）。PTTG,c-myc在不同分化程度肺癌中的阳性表达率差别有统计学意义（P0.05）,而p53在不同分化程度肺癌中阳性表达差别无统计学意义（P>0.05）。PTTG, c-myc在淋巴结有转移的肺癌细胞中阳性表达率明显高于无转移者，差别有统计学意义（P0.05）,而p53在两者间的阳性率差别无统计学意义（P>0.05）,见表2 。
2.3 PTTG, c-myc和p53之间表达相关性
经Spearman等级相关分析NSCLC中PTTG阳性表达与 c-myc呈显著正相关(r=0.516,P0.01)。PTTG阳性表达与p53呈显著正相关(r=0.418,P0.01)。c-myc阳性表达与p53呈显著正相关(r=0.309,P0.05)。