高效液相色谱法测定喘平滴丸中东莨菪碱的含量(一)

详细内容

作者：李晓燕，冯中，吴燕红，朱盛山，霍务贞

【摘要】 　　目的建立测定喘平滴丸中东莨菪碱含量的高效液相色谱法。方法采用ZORBAX SB-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）为色谱柱，以甲醇－0.001 mol・L-1磷酸（70∶30）（流动相含0.02 mol・ L-1十二烷基硫酸钠）为流动相，检测波长：216 nm，流速：1.0 ml・min-1，外标法定量。结果东莨菪碱在0.028 5～0.285 μg范围内呈线性关系，方法回收率为98.86%（n=6），RSD为2.54%。结论此法简便、准确，重复性好，可用于喘平滴丸中东莨菪碱含量测定。

【关键词】 高效液相色谱法 喘平滴丸 东莨菪碱

　　喘平滴丸由麻黄、洋金花等中药组成的中药复方制剂。其中洋金花的主要化学成分东莨菪碱，有显著的中枢抑制、麻醉作用，一般剂量就能消除情绪激动，使人产生倦意，进入无梦的睡眠状态，产生“健忘”等症，严重者嗜睡、昏迷，最后死于呼吸中枢抑制或麻痹，呼吸和循环衰竭。方中洋金花处方量虽然比例小，为了该复方制剂的用药安全，本课题组对该复方制剂中微量的东莨菪碱进行含量监控，为该药的安全使用提供数据参考。

　　1 仪器与试药

　　1.1 仪器

　　Agilent1100高效液相色谱仪系列(G1311A四元泵、G1313A自动进样器、G1314A-VWD检测器)；色谱柱:ZORBAX SB-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm），SN: USCL017850， BP211D电子分析天平(Sartorius)。

　　1.2 试药

　　甲醇为色谱纯试剂，水为三蒸水，其它试剂均为分析纯。氢溴酸东莨菪碱对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号：100049-200308)，喘平滴丸3批（本所研制，批号：20070516，20070518，20070520）。

　　2 方法与结果

　　2.1 溶液的制备

　　2.1.1 对照品溶液的制备取氢溴酸东莨菪碱对照品约10 mg，精密称定，置50 ml容量瓶，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀,得对照品贮备液。精密量取对照品贮备液1.0 ml ,置10.0 ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀。即得（0.021 4 mg・ml-1）。

　　2.1.2 供试品溶液的制备取本品20丸，精密称定，置具塞锥形瓶中，加10 ml 0.01％盐酸超声溶解，用浓氨水调pH值至9，转移入梨形分液漏斗中，用氯仿（15，15，10，10 ml）分次萃取，取氯仿层至蒸发皿中，用甲醇溶解转入10 ml量瓶中，滤过（0.22 μm），取续滤液即得。

　　2.1.3 阴性样品溶液的制备按处方工艺制备缺洋金花的浸膏，依供试品溶液制备方法制备。

　　2.2 色谱条件及系统适用性试验色谱柱为ZORBAX SB-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相甲醇－0.001 mol・L-1磷酸（流动相含0.02 mol・L-1十二烷基硫酸钠）（70：30），检测波长216 nm，流速1.0 ml・min-1。在上述色谱条件下，分别吸取对照品溶液12 μl，供试品溶液和阴性对照溶液各3 μl，注入液相色谱仪，色谱图见图1～3。