沙参体外抑菌活性的初步研究(一)

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作者：胡定慧，丁建刚， 阮期平

【关键词】 沙参；,,抑菌活性；,,最低抑菌浓度

　　摘要：目的对沙参提取物的体外抑菌活性进行初步研究。方法用水50%乙醇浸提有机溶剂萃取，以纸片法进行活性测定。结果提取物对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌有抑制作用，最低抑菌浓度为5 mg/ml，50%乙醇提取效果优于水，醋酸乙酯萃取液抑菌效果最明显。结论 沙参提取物是一种有效的抑菌药物。

　　关键词：沙参； 抑菌活性； 最低抑菌浓度

　　Studies on Antibacterial Properties Isolated from Radix Adenophorae

　　Abstract：ObjectiveTo study the antibacterial properties of root extracts from Radix Adenophorae.MethodsThe different extracting solvent was tested with the filter paper method.ResultsThe antibacterial function of the extract by 50% alcohol had evident effect on Staphylocous aureus and Pseudomonas aeruginosa with the minimum inhibition concentration (MIC) 5 mg/ml. The main antibacterial constituent was focused on the extract of ethyl acetate.ConclusionThe extract from Radix Adenophorae was an effective antibacterial drug.

　　Key words：Radix Adenophorae； Antibacterial properities； MIC

　　沙参有北沙参Radix Glehhniae和南沙参Radix Adenophorae之分〔1〕。北沙参为伞形科多年生草本植物珊瑚菜和根，而南沙参为桔梗科沙参属多年生草本植物轮叶沙参Adenophora tetraphylla（Thunb.）Fisch.，杏叶沙参Adenophora stricta Miq.及阔叶沙参Adenophora pereskiae-folia (Fisch.) G. Don）的根，它是常用中药之一，具有养阴清肺、化痰、益气等功效，临床上主要用于治疗肺热燥咳、阴虚劳嗽、干咳痰黏、气阴不足、烦热口干等症〔2〕，但对于其抑菌方面的活性却未见报道。因此本实验以南沙参植物轮叶沙参、杏叶沙参为原料，以其干燥根提取物为实验药剂，用传统的体外抑菌活性实验方法，初步研究沙参对几种常见的致病菌的抑制作用，旨在寻找新的有效的抗菌药物，并进一步开发沙参的药用价值。

　　1 材料和方法

　　1.1 材料

　　1.1.1 沙参购自四川诚隆药业有限公司。

　　1.1.2 菌种 大肠杆菌Escherichia coli、金黄色葡萄球菌Staphylocous aureus、绿脓杆菌Pseudomonas aeruginosa由绵阳师范学院分子生物与微生物制药重点实验室提供。

　　1.1.3 培养基 采用牛肉膏蛋白胨培养基。

　　1.1.4 化学试剂 乙醇、正丁醇、醋酸乙酯、石油醚、丙酮均为国产分析纯。

　　1.2 方法

　　1.2.1 沙参粗提液的制备 准确称取沙参5 g，分别以蒸馏水、50%乙醇浸泡过夜，离心弃沉淀，得粗提液，减压浓缩至25 ml，该溶液分别用正丁醇、醋酸乙酯、石油醚、乙醚萃取，充分振荡，静置，直到两相液面完全分开。用分液漏斗将有机溶剂相与水相分开，收集有机溶剂分别进行抑菌活性研究。

　　1.2.2 抑菌活性测定纸片法 参考张文治等〔3～5〕法，用移液枪移取20 μl指示菌（金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌）悬液，接种在固体培养基上，涂布棒将菌液均匀涂布于平皿上。将直径为5 mm的灭菌滤纸圆片浸泡于中药提取液中，取出隔一定距离平铺于含菌培养皿中，在适宜的温度下（大肠杆菌37℃，金黄色葡萄球菌28℃，绿脓杆菌28℃）培养一定时间，观察结果，用游标卡尺测得抑菌圈直径，取其平均值，计算出抑菌率和最低抑菌浓度（MIC）。最低抑菌浓度是滤纸片周围刚出现抑菌圈的浓度〔5〕。以无待测样的试液作为空白，每个样品做两个平行，实验重复3次。抑菌率用下述公式计算〔6，7〕，

　　抑菌率（%）＝实验组平均抑菌圈直径-空白滤纸片直径 空白滤纸片直径 ×100 %