复方夏枯草胶囊质量标准的研究(一)

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【摘要】 建立复方夏枯草胶囊的质量标准。方法 用薄层色谱法鉴定黄芩、钩藤等；用HPLC法对夏枯草中熊果酸进行含量测定。结果 薄层图谱斑点清晰，阴性对照无干扰。夏枯草中熊果酸在0.473～3.5μg（r=0.9992）范围内，对照品浓度与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率为98.79％，RSD1.27％。结论 该质量控制方法简便可行，精密度高，重现性好，可用于复方夏枯草胶囊质量控制。

【关键词】 复方夏枯草胶囊 质量标准 TLC HPLC

【Abstract】 Objective To establish the quality standard for Fufang Xiakucao Capsule.Methods Qualitative analysis of Baicalin,Uncaria rhynchophylla Jacks were identified by TLC and the contents of Ursolic acid in Prunella vulgaris L.was determined by HPLC．Results The spots in the TLC were clear and identified without the interference of negative control.The linear range of Ursolic acid was 0.473 ～3.5μg（r=0.9992）．The average recovery rate was 98.79％ wih RSD 1.27％．Conclusion The methods are simple，feasible，aurate ,with good reproducibility and can be used for the quality control of Fufang Xiakucao Capsule．

【Key words】 Fufang Xiakucao Capsule;quality standard; TLC; HPLC

复方夏枯草胶囊是在临床验方基础上研制的治疗高血压病的中药复方制剂，由夏枯草、黄芩、钩藤等药味配伍而成，组方中夏枯草、黄芩均为重要组成，夏枯草中含有熊果酸成分，具有镇静、抗菌、抗炎等作用；黄芩主要功用为抗炎、降压、镇静，主要有效成分以黄酮类化合物黄芩苷为主。因此，制订复方夏枯草胶囊中黄芩等的定性标准及熊果酸的定量标准，对确保该产品的临床疗效有重要的意义。为有效控制本品质量，采用TLC鉴别黄芩、钩藤；用HPLC法测定熊果酸的含量，保证测定的专属性和结果的准确性。

1 仪器与试药

采用Waters高效液相色谱系统；CAMAG （瑞典）薄层色谱扫描仪；Waters 2487双波长紫外检测器。

复方夏枯草胶囊为青岛国风药业股份有限公司提供，阴性对照样品为自制。熊果酸标准品（批号：0742-9706）；黄芩苷标准品（批号120955-200406）；钩藤对照药材（121190-200402），均由中国药品生物制品检定所提供。硅胶G（青岛海洋化工厂）；甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯；水为重蒸馏水。

2 方法与结果

2.1 钩藤的鉴别〔3〕 取本品内容物2g，加入浓氨试液10ml使溶解，用三氯甲烷60ml加热回流1h，滤过，滤液蒸干，残渣加3%盐酸溶液20ml使溶解，用浓氨试液调pH至碱性，再用乙醚提取3次，每次20ml，合并乙醚液，挥干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。同法制除钩藤外的阴性对照液。另取钩藤对照药材2g，同法制成对照药材溶液。吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-乙酸丁酯-氨水（18：3：0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。见图1。

图1 钩藤色谱图

注：1,3.样品 2.钩藤对照药材 4.阴性对照

2.2 黄芩的鉴别 取本品内容物2g，加无水乙醇回流提取1h，滤过，滤液蒸干，残渣加1%硫酸溶液10ml使溶解，用乙酸乙酯提取3次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。同法制备除黄芩外的阴性对照液。再取黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述三种溶液各3μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-正丁醇-甲酸-水（15：3：1：2）为展开剂展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视，再喷以2%三氯化铁乙醇溶液显色，日光下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照液无相同斑点。见图2。

图2 黄芩苷色谱图

注：1，3.样品液 2.黄芩苷对照品 4.阴性液

2.3 熊果酸含量测定〔2〕

2.3.1 色谱条件 色谱柱：chromasil C18（规格4．6mm×200mm,5μm）；流动相：甲醇-水（85：15），检测波长210nm，进样量20μl。理论塔板数按熊果酸峰计算应不低于4000。样品测定色谱图见图3。

图3 熊果酸含量测定的HPLC图谱

注：A：样品 B：对照品 C：阴性对照溶液

2.3.2 对照品溶液的制备 精密称取熊果酸对照品，用甲醇将其定容至刻度，摇匀，制成浓度为20μg／ml对照品溶液。