温润养血颗粒治疗肺纤维化的实验研究(一)

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作者：朱际平， 孙子凯， 朱海青 '

【关键词】 肺纤维化；,,大鼠；,,中药复方；,,实验研究

　　摘要：目的：寻找治疗肺纤维化有效的中药复方制剂。方法：将36只SD大鼠随机分成正常组、假手术组、模型组和小、中、大剂量组，每组6只。从造模第2天开始给予温润养血颗粒治疗，28 d后处死，取左上肺以10%中性福尔马林固定，做HE、VG、MASSON染色，进行病理检查，并以电子计算机图象分析系统进行图象量化分析。结果：病理光镜检查显示，治疗组肺泡炎和肺纤维化程度较模型组轻，治疗组肺间隔面积/视场面积小于模型组(P＜0.05)，治疗组肺间隔灰度/肺泡灰度大于模型组(P＜0.05)。结论：温润养血颗粒可以有效抑制由急性肺损伤引起的肺纤维化，小剂量给药效果最好。

　　关键词：肺纤维化； 大鼠； 中药复方； 实验研究

　　肺纤维化是多种肺间质疾病的共同结果。主要表现为进行性呼吸困难、干咳等症状，其死亡率较高。目前对其治疗以口服糖皮质激素为主。温润养血颗粒是根据曹世宏教授的临床经验方化裁而成，在临床应用中获得较好疗效。本实验采用博莱霉素引发的肺纤维化大鼠模型为实验对象，以温润养血颗粒治疗28 d，将各组大鼠的肺组织做病理切片，利用计算机图象分析系统进行图象分析，评价疗效。

　　1 材料和方法

　　1.1 动物清洁级SD雄性大鼠36只，由中国科学院上海实验动物研究所提供，体重210～250 g。完全随机分成6个组，分别为：正常组、假手术组、模型组、小剂量组、中剂量组、大剂量组。动物饲养条件：温度20℃，湿度47%。

　　1.2 实验药物温润养血颗粒(批号：021029)，由江苏省中医医院制剂部提供。其组成是：人参，蛤蚧，当归，熟地，丹参，川芎等共13味。实验用药为浸膏制剂，浓度以生药计为3.8 g/L。实验剂量确定以临床用量(以生药计：24 g/kg体重)的4倍为大剂量，2倍为中剂量，临床用量为小剂量，分别为9.6，4.8，2.4 g/kg。实验时将浸膏临时配制成相应浓度(0.96，0.48，0.24 g/ml)，灌喂量为1 ml/100 g体重，模型组灌喂相同体积的生理盐水。从造模后第2天开始治疗，1次/d，共28 d。博莱霉素(BLM)由日本化学株式会社生产，1.5 mg/只，溶于0.3 ml生理盐水中。

　　1.3 肺间质纤维化模型的制作按文献〔1〕的方法进行。实验组动物用乙醚吸入麻醉后，切开颈部皮肤，以血管钳钝性分离暴露气管，用注射器在环状软骨间刺入气管腔，向气管内注射博莱霉素(1.5 mg/只溶于0.3 ml的生理盐水中)，假手术组动物在相同条件下气管内注射生理盐水0.3 ml。注射后立即将大鼠直立并前后旋转。正常组同期饲养，不作任何处理。

　　1.4 病理学评价方法取大鼠的左上肺以10%中性福尔马林固定，酒精梯度脱水，石蜡包埋，制成5 μm的切片，做HE，VG，MASSON染色。

　　形态定量分析采用Mias2000图象分析系统(四川大学图象图形研究所)，将切片进行HE，VG染色，将切片置于分析仪显微镜上，在100倍下每例切片自左向右，自上向下选取10个视野，分别测定肺泡间隔面积，视场面积，肺泡间隔灰度，肺泡灰度。测定条件：分辨率800×600，256度灰阶。

　　所有数据以±s表示，治疗组与模型组先进行F检验，检验方差齐性。再进行t或t'检验。治疗组间进行方差分析。P＜0.05为有显著性差异。