乳腺癌组织中骨桥蛋白和骨连接蛋白的表达及其临床病理意义(一)
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作者：杨光，张祥宏，王晓玲，赵俊京，张志刚，严霞，王俊灵
【摘要】 目的 探讨乳腺癌组织中骨桥蛋白（OPN）、骨连接蛋白（ON）的表达及其临床病理意义。方法 采用免疫组织化学SP法检测61例浸润性乳腺癌OPN、ON的表达，并与临床病理特征及钼靶X线征象进行对比分析。结果 本组乳腺癌组织中OPN和ON的阳性高表达率分别为72.13%和77.05%，均明显高于乳腺良性肿瘤（44.83%和37.93%，P0.05）。钼靶X线发现微钙化的钙化组乳腺癌病例中OPN、ON高表达率分别为87.50%和91.67%，明显高于无钙化组(62.16%和67.57%，P0.05)。（P＞0.05 ）。结论 OPN、ON在乳腺癌组织中高表达，OPN、ON高表达与钼靶X线微钙化征象密切相关，但与各临床病理特征及X线片中毛刺征无相关性。
【关键词】 乳腺癌 骨桥蛋白 骨连接蛋白；钼靶X线摄影
Expression and Clinicopathlogic Significance of OPN and ON in Breast Carcinoma
Key words：Breast carcinoma; Osteopontin; Oteonection; Mammography;
骨桥蛋白（Osteopontin，OPN）是一种含有特异短肽RGD（Arg?Gly?Asp）序列的磷酸化糖蛋白。骨连接蛋白（Osteonectin，ON）又名SPARC，即富含半胱氨酸（Cys）的酸性蛋白（Secreted Protein Acidic and Rich in Cystein）。最近研究显示，OPN、ON不仅与骨组织的矿化有关，而且在肿瘤的侵袭转移方面具有重要作用。目前，就乳腺癌OPN、ON表达与其临床病理意义的研究较少；而与其钼靶X线征象相关性研究尚未见报道。有鉴于此，我们采用免疫组织化学SP方法，观察了二者在乳腺癌组织中表达情况，探讨了其与临床病理因素、影像学表现及患者预后之间的关系。
1 资料与方法
1.1 资料
收集我院2003年9月～2004年11月，行改良根治术，且钼靶X线检查及临床资料齐全的61例浸润性乳腺癌组织标本。患者均为女性，28～75岁，中位年龄50岁，其中，28～40岁9例，41～55岁39例，55～75岁13例。均单侧发病，右乳27例，左乳34例。按WHO肿瘤病理诊断标准，其中浸润性导管癌34例，浸润性小叶癌20例，其他类型7例；其中高分化11例 ，中度分化45例，低分化5例。病理证实腋下淋巴结转移31例（50.82%）。根据1997年国际抗癌联盟（UI）临床TNM分期标准：Ⅰ期、Ⅱa期共28例（45.90%），Ⅱb期16例（26.23%），Ⅲ期17例（27.87%）。由三位有经验的影像诊断医师阅片，参照美国放射学会乳腺影像报告及数据系统（BI?RADS）标准，对癌瘤微钙化征象及毛刺征进行描述和分组，其中微钙化表现24例（39.34%），包括肿块伴微钙化18例和单纯微钙化6例，见图1；毛刺征24例（39.34%），包括肿块伴有毛刺16例，见图2，星芒状长毛刺8例。收集同时期门诊手术病理证实的乳腺良性肿瘤29例（导管内乳头状瘤8例，纤维腺瘤21例）做对照分析。
1.2 方法
鼠抗人OPN单克隆抗体、羊抗人ON多克隆抗体均购自美国Santa Cruz公司。SP试剂盒均购自武汉博士德生物工程有限公司。免疫组化SP法严格按照说明书操作步骤进行，采用微波抗原修复。结果判定：PBS代替一抗作空白对照，胞浆和胞膜中棕黄色颗粒染色为OPN、ON阳性表达细胞。选择5个高倍视野，按阳性细胞数占同类细胞的百分比，将结果分为：阴性（-），5％ ；弱阳性（+），5％～25％；阳性（++），26％～50％；强阳性（+++），>50％。 其中（-）和 （+）为低表达，（++）和 （+++）为高表达。
1.3 统计学处理 SAS统计学软件χ2 检验，P＜0.05有统计学意义。
2 结果
2.1 OPN、ON在乳腺癌组织中的表达
OPN、ON表达位于癌细胞胞膜及胞浆，见图3、4，此外，血管平滑肌细胞及乳导管上皮细胞亦可见表达。本组病例，OPN蛋白阳性表达率为83.61%（51/61），其中高表达率为72.13%（44/61）。ON蛋白阳性表达率为88.52%（54/61），其中高表达率为77.05%（47/61）。二者均高表达36例。对照组29例乳腺良性肿瘤中OPN、ON高表达13例和11例，高表达率分别为44.83%和37.93%。乳腺癌组织OPN和ON高表达率均明显高于乳腺良性肿瘤（OPNχ2=6.310，P=0.012；ONχ2=13.126，P=0.001）。
2.2 OPN、ON表达与乳腺癌各临床病理特征的关系
统计学结果显示，本组病例年龄组、临床分期、组织类型、分化程度及淋巴结转移各组间OPN、ON高表达率均无显著差异（P＞0.05），见表1。
2.3 OPN、ON高表达与乳腺癌钼靶X线征象的关系
钙化组乳腺癌OPN、ON高表达率明显高于无钙化组，提示乳腺癌组织OPN、ON高表达与钼靶片中微钙化表现密切相关。毛刺组乳腺癌OPN、ON高表达率均低于无毛刺组，但无统计学意义（P＞0.05），见表2。