HPLC法测定祛暑胶囊中甘草酸的含量(一)

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【摘要】 目的 建立祛暑胶囊中甘草酸含量的测定方法。方法 采用HPLC法，Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相为甲醇－0.2 mol/L醋酸铵－冰醋酸(67∶33∶1)；流速0.8 mL/min；检测波长250 nm。结果 祛暑胶囊中甘草酸含量测定方法线性范围为188.06～494.59 μg/mL；平均回收率为103.3 %，RSD为2.2 %(n＝6)，理论塔板数大于2000。结论 HPLC法测定祛暑胶囊中甘草酸含量简便、准确、重复性好。

【关键词】 HPLC；祛暑胶囊；甘草酸；含量

祛暑胶囊主要由广藿香、香薷、甘草等组成，临床使用多年，用于治疗中暑感寒引起的恶寒发热等症。本文选取方中主药甘草所含主要成分甘草酸为指标，参考中国药典[1]，采用高效液相色谱法对祛暑胶囊含量测定方法进行研究，以便控制该制剂的质量。

1 实验药品、试剂

祛暑胶囊(批号20050819),甘草酸单铵盐对照品(中国药品生物制品检定所,批号110731－200205),甲醇(色谱纯)，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。

2 实验仪器

美国瓦里安Prostar 210型高效液相色谱仪，瓦里安Prostar 325型紫外－可见检测器。

3实验方法及结果

3.1 色谱条件

Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相为甲醇－0.2 mol/L醋酸铵－冰醋酸(67∶33∶1); 流速0.8 mL/min；检测波长250 nm。

3.2对照品溶液的制备

精密称取在60 ℃真空干燥至恒重的甘草酸单铵盐对照品2.4 mg，置于10 mL棕色容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每毫升含甘草酸单铵盐对照品0.24 mg，折合甘草酸235.08 μg)。

3.3供试品溶液的制备

取本品内容物约2 g，精密称定，置50 mL容量瓶中，加流动相约45 mL，超声处理30 min，加流动相至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，用微孔滤膜(0.45 μm)滤过，取滤液，即得供试品溶液。另取不含甘草酸制得的阴性对照制剂同法制得阴性对照品溶液。

3.4系统适应性试验

取上述对照品溶液、阴性对照品溶液及供试品溶液，照3.1项下色谱条件，各进样10 μL，测得HPLC图谱，见图1。图谱表明阴性对照品溶液色谱在与对照品溶液色谱相同位置无干扰。理论塔板数按甘草酸计算不低于2000。甘草酸单铵盐对照品 供试品溶液 阴性对照品溶液

图1高效液相色谱图

3.5 线性关系的考察

分别吸取对照品溶液4.0 mL、5.0 mL、6.0 mL、7.0 mL、8.0 mL分别置于10 mL容量瓶中加流动相稀释至刻度，摇匀，各进样10 μL，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积为纵坐标，对照品浓度为横坐标(μg/mL), 进行线性回归，得回归方程为：Y= 1636.3X- 91714，相关系数r＝0.9993，表明甘草酸在188.06～494.59 μg/mL范围内具有良好的线性关系。