老年下呼吸道感染患者外周血细胞免疫表型分析(一)

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【摘要】 目的： 了解老年人下呼吸道感染时机体细胞免疫状态，为合理有效的干预提供一定的参考。方法: 采用流式细胞仪检测老年下呼吸道感染患者及健康老年组外周血淋巴细胞免疫表型（CD3，CD4，CD8，CD4/CD8比值，CD16，CD19），观察老年人下呼吸道感染时机体细胞免疫功能变化。结果: 老年健康组CD3、CD4 较对照组降低， CD4/CD8比值降低。老年感染组CD3、CD4、CD4/CD8比值、CD19较对照组及老年健康组均降低，CD8水平升高，差异均有显著性（P＜0.05）。结论: 老年人下呼吸道感染的发生、发展与机体的细胞免疫功能紊乱有关。对细胞免疫功能的监测，可作为评估老年个体免疫状态及对老年人下呼吸感染的预防、治疗以及合理有效干预的参考。

【关键词】 呼吸道感染； 免疫，细胞； 老年人

〔Abstract〕 Objective: To collect information of the cellular immunity of aged patients with lower respiratory infection, and so as to provide reference for reasonable and effective intervention of the disease. Methods: The contents of lymphocytes CD3, CD4, CD8, CD4/CD8, CD16, CD19 in peripheral blood of aged patients with lower respiratory tract infection (group LRI) and healthy old people (group HOP) were detected with flow cytometry. Results: The levels of CD3, CD4, and CD4/CD8 in the group HOP were lower than those of young control group (YCG). The levels of CD3, CD4, CD4/CD8, and CD19 in group LRI were lower than those of groups YCG and HOP. The level of CD8 was higher in group LRI than that in YCG. The difference was significant(P0.05). Conclusions: The ourrence and the progress of lower respiratory tract infection in aged people are related to disorder of cellular immunity. Monitoring on the changes of immunological function is helpful to the eva luation of individual immunity condition of aged people, and can provide reference to the prevention, treatment and effective intervention of the disease.

〔Key words〕 respiratory tract infections; immunity,cellular; aged

随着社会人口的老龄化，下呼吸道感染是严重危害老年人健康的常见感染性疾病。也是造成老年人死亡的重要原因之一。而老年人对感染性疾病的易感性和难治性始终成为困扰老年病治疗的一大难题。采用流式细胞仪对老年人群与老年下呼吸道感染患者外周血淋巴细胞表型进行分析，旨在了解老年人下呼吸道感染时机体细胞免疫功能的变化，为合理有效的干预提供一定的参考。

1 对象与方法

1.1 研究对象

老年下呼吸道感染患者30例，年龄65~95岁，平均（76±8.3）岁，均为男性。为2005年11月~2007年12月在贵阳医学院综合病房住院的老年患者。健康老年组26例，男24例，女2例，年龄63~84岁，平均（68±5.8）岁，为同期健康体检者。健康志愿者30例作为正常对照组。所有人员均无肿瘤病史，未使用影响免疫功能的药物。

1.2 诊断标准

社区获得性肺炎（CAP）诊断符合中华医学会呼吸病学分会2006年修定的《社区获得性肺炎诊断和治疗指南》[1]；慢性阻塞性肺疾病急性加重（AECOAP）诊断符合中华医学会呼吸病学分会1997年制定的《COPD的诊治规范（草案）》[2]。

1.3 检测方法

1.3.1 淋巴细胞免疫功能检测 静脉取血2 ml，以EDTAK2抗凝，立即送检，2 h内进行荧光抗体染色。所有荧光抗体为Simultest IMK-lymphocyte试剂（美国Becton Dickinson产品）。每份标本同时做6管即IgG1/Ig2a(对照管),CD45/CD14（对照管），CD3/CD19，CD3/CD4，CD3/CD8，CD3/CD16+56，分别加入相应荧光抗体20 μl和100 μl抗凝血于各管底部，彻底混合后，置室温暗处孵育20 min，然后加入Ⅸ溶血素（FACS溶解液）2 ml，迅速于混旋器上混匀，置室温处放置8 min，弃上清液，加入PBS 2 ml洗涤，并以1 000 r/min离心5 min，弃上清液，加入100 μl PBS混匀后立即上流式细胞仪检测。

1.3.2 流式细胞仪检测 采用美国BD 公司流式细胞仪FACSCalibur,以三色荧光标准微球，启动FACS 软件，使仪器处于最佳工作状态。用 Simulset软件分析淋巴细胞CD3/CD19、CD3/CD4、CD3/CD8、CD3/CD16+56、CD4/CD8。