石斛对实验大鼠慢性萎缩性胃炎御炎机制的研究(一)
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作者:陆高翔,潘小炎,潘兴寿,李天资,韦华
【摘要】 目的 探讨石斛对慢性萎缩性胃炎(CAG)的防治机制,为临床提供实验依据。方法 用氨水、乙醇和去氧胆酸钠灌胃法,制成大鼠CAG模型。造模后治疗组以石斛煎剂治疗5周,观察CAG胃黏膜血流量和前列腺素E2(PGE2)的变化情况。并与模型组和对照组比较。结果 治疗组和模型组建模后(治疗前)其胃黏膜血流量和PGE2含量均较对照组低(P均0.01)。治疗组经石斛治疗5周后,其胃黏膜血流量较模型组高(P0.01),与对照组比较差异无显著性(P>0.05);治疗组PGE2含量较模型组高(P0.01),与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论 石斛可以改善实验大鼠CAG的胃黏膜血流量,提高其PGE2含量,提示其对CAG大鼠的胃黏膜有提高其屏障功能和御炎作用,对CAG有防治作用。
【关键词】 动物实验;大鼠;石斛;胃炎,萎缩性;胃黏膜血流量;前列腺素E2
Abstract: Objective To investigate the anti-inflammatory mechanism of dendrobium decoction on models of experimental chronic atrophic gastritis (CAG) in rats and to provide laboratory evidences for clinical use of dendrobium decoction. Methods The CAG models in rats were produced by intragastric ammonia water, ethanol and deoxysodium cholate infusion. The model rats were given dendrobium decoction for five weeks. The measurement of gastric mucosa blood flow volume and prostaglandin E2 (PGE2) was conducted and a parison of these two indices among the therapeutic group, the model group and the control group was performed. Results Gastric mucosa blood flow volume and PGE2 for the therapeutic group and the model group (before drug administration) decreased significantly than that for the control group (all P0.01). 5 weeks after dendrobium decoction, the gastric mucosa blood flow volume for therapeutic group was lower than that for model group (P0.01), in parison to the control group, there was no significant difference (P>0.05). PGE2 for the therapeutic group was higher than that for the model group(P0.01), in parison to the control group, there was no significant difference (P>0.05). Conclusion Dendrobium decoction can lower down gastric mucosa blood flow volume in models of experimental CAG in rats and up-regulate PGE2. The data indicated that Dendrobium decoction can enhance the barrier action of gastric mucosa in models of CAG in rats and have the anti-inflammatory and preventive function.
Key words: animal experiments; rats; Dendrobium Sw; gastritis, atrophic; gastric mucosa blood flow volume; prostaglandin E2
研究表明〔1〕,胃黏膜血流量和前列腺素E2(PGE2)含量是评价胃黏膜屏障功能状态的重要指标,石斛属(Dendrobium Sw.)是兰科中一个最大的属,它包括1100余种植物,分布于亚洲、欧洲、大洋洲等地。在我国传统医学中,石斛属多种植物的新鲜或干燥茎披收做药用,统称石斛,具有滋阴清热、益胃生津、润肺止咳的功效。在印度传统医学中,石斛属许多种植物也用做草药。我院中西医结合消化病专家应用石斛治疗慢性萎缩性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)及胃癌前病变取得颇佳的临床效果,为进一步明确其疗效,笔者在复制大鼠CAG模型的同时,进行石斛预防实验,至预定阶段取胃黏膜作病理学检查并检测血清胃黏膜血流量和PGE2含量变化情况,以探讨其可能的作用机制。现报道如下:
1 材料与方法
1.1 动物及分组 采用2个月±2天龄,体重(200±10)g,一级质量标准的雌性远交系Wistar大鼠,由广西医科大学实验动物研究所提供。购回后采用架式笼养,室温为(20±2)℃,湿度50%~60%,光照明暗各12h交替,单独空调。先在动物室饲养4天后随机分为对照组、模型组和石斛治疗组(石斛组)3组,分笼喂养,每笼25只。
1.2 实验用药物及试剂〔2〕 氨水:中国瓶窑医药化工试剂厂,批号20060431,现用现配成浓度0.1%氨水;乙醇:纯度>99.5%,宜兴市钮家化工助剂厂,批号20060113,现用现配成60%乙醇溶液;去氧胆酸钠:Serva公司生产,上海化学试剂采购供应站进口分装经销,批号2005618,现用现配成20 mmol/L溶液;石斛煎剂:石斛300g加水2000ml于陶瓷皿慢火煎60min,过滤备用。
1.3 实验方法 ①对照组:不造模,灌服生理盐水,每只5ml,每日1次,连续5周;②模型组和石斛组:用0.1%氨水作为饮用水自由饮用;20mmol的去氧胆酸钠溶液每日灌胃1次,每次2ml;60%的乙醇每周空腹灌胃2次,每次2ml。上述三因素共处理16周建立鼠CAG模型;实验进行至16周(治疗前)每组取11只大鼠处死;取标本备检,对照组鼠胃病检无明确病态表现,模型组和石斛治疗组鼠胃病检均符合CAG表现,表示造模成功。③模型组停止造模,灌服生理盐水,石斛治疗组也停止造模,每日每只大鼠灌服石斛水煎剂5ml,连续5周。至21周(治疗后)末次给药后所有大鼠禁食12h,自由饮水,12h后麻醉,先用彭贵祖〔3〕改良的中性红清除法测定大鼠胃黏膜血流量,再逐只处死,平行胃小弯取小块胃窦部胃壁组织,手工制成胃黏膜组织芯片做病理形态学观察。
1.4 胃黏膜PGE2的测定方法 取出鼠胃,迅速刮取胃黏膜,于液氮中速冻,称重后,放入匀浆器中,加无水乙醇0.4ml,轻研磨后,再加入生理盐水1.6ml,研磨制成匀浆,离心10 min(10000 r/min),取上清液,将其放置-30℃冰箱保存备检。
1.5 标本及化验试剂 胃黏膜PGE2放免试剂盒由第二军医大学神经生物学教研室提供;复融后按放免试剂盒说明测定。
1.6 统计学方法 计量资料用±s表示,运用SPSS 11.5统计软件包进行检验。
2 结果
石斛组治疗前后胃血流量、PGE2含量比较差异有高度显著性(P均0.01),模型组、对照组治疗前后组内比较差异无显著性(P>0.05)。石斛组和模型组建模后(治疗前)其胃黏膜血流量和PGE2含量均低于对照组(P均0.01)。石斛组经石斛治疗5周后,其胃黏膜血流量高于模型组(P0.01),与对照组比较差异无显著性(P>0.05);石斛组PGE2含量较模型组高(P0.01),与对照组比较差异无显著性(P>0.05),见表1。
表1 石斛对CAG大鼠胃黏膜血流量、PGE2含量的影响(略)
注:与本组治疗前比较,a:t=0.30,b:t=0.24,e:t=0.37,f:t=0.36,P均>0.05;c:t=3.61,d:t=6.97,P均0.01;与石斛组比较,g:t=5.54,h:t=6.53,m:t=5.09,n:t=4.92,P均0.01;i:t=1.50,j:t=0.46,k:t=0.04,l:t=0.09,P均>0.05;与对照组比较,o:t=4.97,p:t=3.88,P均0.01